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供應(yīng)簡(jiǎn)介

REPOTMGAS慢病毒報(bào)告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測(cè)GAS轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因慢病毒顆粒。GAS（gamma-activated sequence,GAS）又稱γ干擾素活化序列在皮膚發(fā)生遲發(fā)型接觸性過(guò)敏時(shí)，可與轉(zhuǎn)位至角朊細(xì)胞核內(nèi)的STAT-91結(jié)合而激活K17的表達(dá)。

詳細(xì)介紹

REPO^TMGAS慢病毒報(bào)告基因主要用于檢測(cè)細(xì)胞中干擾素調(diào)控的信號(hào)通路的活性、藥物研究以及基因過(guò)表達(dá)和RNAi的表型分析等。

pGMLVGAS-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)GAS結(jié)合位點(diǎn)，可以高靈敏度地檢測(cè)GAS的激活水平。采用慢病毒作為報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn)在于它能夠感染多種難感染的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞，干細(xì)胞，神經(jīng)元細(xì)胞等。而且慢病毒能夠?qū)⑼庠椿虿迦爰?xì)胞基因組內(nèi)，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜：

質(zhì)粒元件信息：

5'LTR	1-635
PBS （primer binding site）	636-653
Ψ （packaging signal）	685-822
RRE （Rev-response element）	1303-1536
cPPT （central polypurine tract）	2028-2151
GASresponse element	2191-2232
Luciferase	2298-3950
P_PGK（phosphoglycerate kinase promoter）	3980-4488
Puro^r（puromycin resistance gene）	4509-5108
WPRE（woodchuck posttranscriptional regulatory element）	5122-5713
3'LTR	5916-6552
PUC origin of replication	7695-7022
Amp^r	8836-7840

包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
GM-022026	REPO^TMGAS慢病毒報(bào)告基因	50ul×4管；1×10e7TU/ml
-	說(shuō)明書	-

使用說(shuō)明：

GAS報(bào)告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。用熒光素酶檢測(cè)試劑盒或雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1. 病毒操作時(shí)使用生物安全柜，如使用普通超凈工作臺(tái)操作病毒，請(qǐng)不要打開風(fēng)機(jī)。

2. 病毒操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時(shí)必須特別小心，不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時(shí)超凈臺(tái)有病毒污染，立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過(guò)病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時(shí)應(yīng)遵從以下步驟：擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗(yàn)臺(tái)前，用70%乙醇清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)。

5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗雙手。

保存條件：

-80℃保存。（如保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，使用前請(qǐng)重新檢測(cè)病毒滴度）

參考文獻(xiàn)：

[1] Wu AM, Dalvi P, Lu X, Yang M, Riddick DS, Matthews J, Clevenger CV, Ross DD, Harper PA, Ito S.

Induction of Multidrug Resistance Transporter ABCG2 by Prolactin in Human Breast Cancer Cells.

Mol Pharmacol. 2012 Nov 13.

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Suppression of thymus- and activation-regulated chemokine （TARC/CCL17） production by 3-O-β-D-glucopyanosylspinasterol via blocking NF-κB and STAT1 signaling pathways in TNF-α and IFN-γ-induced HaCaT keratinocytes.

Biochem Biophys Res Commun. 2012 Oct 19;427（2）:236-41. doi: 10.1016/j.bbrc.2012.08.087. Epub 2012 Aug 25.

[3]Kim YJ, Hwang SY, Hwang JS, Lee JW, Oh ES, Han IO.

C6 glioma cell insoluble matrix components enhance interferon-gamma-stimulated inducible nitric-oxide synthase/nitric oxide production in BV2 microglial cells.

J Biol Chem. 2008 Feb 1;283（5）:2526-33. Epub 2007 Nov 2.

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IFN-gamma and its receptor subunit IFNGR1 are recruited to the IFN-gamma-activated sequence element at the promoter site of IFN-gamma-activated genes: evidence of transactivational activity in IFNGR1.

J Immunol. 2006 Jul 1;177（1）:315-21.

[5]Osaki M, Tan L, Choy BK, Yoshida Y, Cheah KS, Auron PE, Goldring MB.

The TATA-containing core promoter of the type II collagen gene （COL2A1） is the target of interferon-gamma-mediated inhibition in human chondrocytes: requirement for Stat1 alpha, Jak1 and Jak2.

Biochem J. 2003 Jan 1;369（Pt 1）:103-15.

產(chǎn)品價(jià)格：

貨號(hào)	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報(bào)價(jià)/元
GM-022026	Lentivirus GAS luciferase reporter 慢病毒報(bào)告基因顆粒	Genomeditech	50ul×4管； 1×10e7TU/ml	3200

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