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Western Blot(WB)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)一步到位
信帆生物提供Western Blot(WB)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),老師僅需要提供樣本,我們提供實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容如下:
1)確定一抗的稀釋比例和孵育時(shí)間;
2)選擇合適的封閉液及封閉時(shí)間;
3)調(diào)節(jié)合適的上樣量,使內(nèi)參條帶灰度值趨于一致。
抗體使用有哪些注意事項(xiàng)?
使用抗體前需仔細(xì)閱讀說明書,了解抗體的保存條件以及不同用途下的推薦稀釋比例。較高濃度的抗體(>0.5mg/mL)通常性質(zhì)更穩(wěn)定,受生產(chǎn)工藝和成本控制等因素影響,不同品牌的抗體的濃度也不相同,所以購買時(shí)應(yīng)注意比較,經(jīng)驗(yàn)不足的實(shí)驗(yàn)者往往被抗體的體積迷惑,要注意相同質(zhì)量下低濃度的抗體體積反而更大。
實(shí)驗(yàn)流程:
蛋白提取-制膠-電泳-轉(zhuǎn)膜-封閉-一抗孵育-二抗孵育-化學(xué)發(fā)光-結(jié)果分析;
送樣運(yùn)輸要求:新鮮組織,100mg以上,干冰運(yùn)輸。細(xì)胞量為5*10^6以上,收集細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。
WB相關(guān)檢測樣本準(zhǔn)備及要求
WB檢測:(檢測某種蛋白的有無及含量差異)
組織樣本:
1、 組織取樣時(shí)洗凈血污,液氮或干冰速凍-80℃保存,保存時(shí)間3個(gè)月內(nèi)為宜,時(shí)間過長蛋白可能降解。
2、標(biāo)本量100mg(黃豆大?。┮陨?。骨頭、脂肪蛋白含量較少組織需提供200-300mg。
細(xì)胞樣本:
1.活細(xì)胞匯合度70%-80%,裝滿新鮮培養(yǎng)基,不透氣培養(yǎng)瓶,封口膜封口常溫運(yùn)輸;
2.細(xì)胞沉淀;
3.細(xì)胞上清,干冰運(yùn)輸。
其他特殊要求:
如客戶提供試劑盒,要求提取特殊蛋白,需要提前和實(shí)驗(yàn)室溝通,并且準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)樣本,保證樣本量充足。
信帆生物對質(zhì)量的控制涵蓋生產(chǎn)、放行、市場質(zhì)量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗(yàn)和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品的精確度、穩(wěn)定性。
Western Blot(WB)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)一步到位
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