核酸外切酶III說明
核酸外切酶III能作用于雙鏈DNA,沿3’→5’方向逐步切去單核苷酸。與底物的每次結(jié)合,只切除zui末的幾個核苷酸,從而對雙鏈DNA產(chǎn)生漸進缺失。zui適底物是平末端或3’凹陷末端DNA,亦可作用于雙鏈DNA的切刻產(chǎn)生單鏈gap,對于對單鏈DNA無活性。3’突出末端抗該酶的切割,拮抗程度隨3’突出末端的長度而改變,四堿基或更長的突出*不能被切割。這種特性對于一端是抗性位點(3’突出端)一端是敏感位點(平端或5’突出端)的線性DNA分子,可以產(chǎn)生單向缺失。例如,可將雙鏈DNA用產(chǎn)生不同末端的限制性內(nèi)切酶雙酶切后,利用Exonuclease III的3′→5′的外切酶活性,從一端降解,得到互補的單鏈DNA和5′-P單核苷酸。與BAL 31 Nuclease相比,本酶的堿基特異性較小,如在富含GC的位置上,由于反應(yīng)停止的機率較低,可用于DNA的Deletion制作。
本是把exonuclease III基因( E. coli)在大腸桿菌中進行表達后,經(jīng)多次純化分離而得到的。
· 質(zhì)量保證
本經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,無核酸內(nèi)、外切酶污染。
· 使用建議
不能切割硫代磷酸的橋連。因此,也可以通過引入一個硫代磷酸核苷酸將DNA分子的一端位點保護起來,再創(chuàng)建單向缺失。
目錄號 | 規(guī)格 | 價格 | 說明書下載 | M007-01A | 3000U | 120元 |  | M007-01B | A包裝×5 | 540元 |
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