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PartI：天然抗體庫(kù)構(gòu)建、免疫抗體庫(kù)構(gòu)建、多種片段抗體庫(kù)構(gòu)建、抗體人源化1、技術(shù)路線外周血淋巴細(xì)胞/脾細(xì)胞?提取RNA/gDNA?PCR出全套抗體片段（Fab、scFv等）?隨機(jī)重組插入噬菌體外殼蛋...

實(shí)驗(yàn)一：大腸桿菌DH5α和BL21感受態(tài)細(xì)胞的制備【實(shí)驗(yàn)步驟】1從LB平板上挑取新活化的大腸桿菌DH5α單菌落，接種到5mLLB培養(yǎng)基中，37℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜。2取1mL培養(yǎng)物接種到100mLLB培養(yǎng)基...

生物制品的生物學(xué)檢定方法生物檢定法是利用微生物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物來(lái)檢定制品效價(jià)的方法，其通過(guò)檢查制品中某些痕量雜質(zhì)可對(duì)生物體產(chǎn)生特殊的生理作用及影響用藥的安全有效性進(jìn)行評(píng)價(jià)。主要包括細(xì)菌學(xué)檢查、純菌檢測(cè)、微生...

1.目的規(guī)范無(wú)菌操作流程，減少及避免發(fā)生染菌現(xiàn)象出現(xiàn)。2.使用范圍無(wú)菌室及潔凈區(qū)的操作。3.無(wú)菌操作技術(shù)原則3.1環(huán)境要清潔，在每次無(wú)菌操作結(jié)束后都需要對(duì)環(huán)境進(jìn)行清理、清洗；且避免操作前進(jìn)行清掃。3....

蛋白-蛋白相互作用是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究中zui重要的方面之一。GSTpull-down將靶蛋白與GST融合表達(dá)，并將蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)親和樹脂上，作為與目的蛋白親和的支撐物，充當(dāng)“誘餌蛋白...

RNAPullDown實(shí)驗(yàn)流程使用體外轉(zhuǎn)錄法標(biāo)記生物素RNA探針，然后與胞漿蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物。該復(fù)合物可與鏈霉親和素標(biāo)記的磁珠結(jié)合，從而與孵育液中的其他成分分離。復(fù)合物洗脫后，...

一．蛋白純化親和層析技術(shù)的原理蛋白質(zhì)親和層析技術(shù)適應(yīng)于理化性質(zhì)差異性較小而難分離的蛋白質(zhì)，親和層析利用固相介質(zhì)中的配基與混合生物分子之間親和能力不同而進(jìn)行分離，當(dāng)?shù)鞍状謽颖荆ɑ旌掀渌s蛋白、糖類、核酸...

DNA測(cè)序技術(shù)是分子生物學(xué)研究中常用的技術(shù)，它的出現(xiàn)極大地推動(dòng)了生物學(xué)的發(fā)展。成熟的DNA測(cè)序技術(shù)始于20世紀(jì)70年代中期。1977年Maxam和Gilbert報(bào)道了通過(guò)化學(xué)降解測(cè)定DNA序列的方法。...

1背景和意義從生命活動(dòng)的直接執(zhí)行者——蛋白質(zhì)的角度研究生命現(xiàn)象和規(guī)律（特別是疾病防治和病理研究）已成為研究生命科學(xué)的主要手段。而這些研究往往離不開對(duì)細(xì)胞、組織或器官中含有蛋白質(zhì)種類和表達(dá)量的研究。對(duì)處...

蛋白怎么“讀”“讀”，在字典里的意思是識(shí)取、讀取，放在蛋白研究中可以理解為對(duì)生物樣本中未知單一蛋白或復(fù)雜蛋白的篩選、鑒定或者定量檢測(cè)。自2003年4月14日人類基因組計(jì)劃（HGP）宣告完成以來(lái)，基因組...