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菌落計數(shù)的操作流程

閱讀:2154      發(fā)布時間:2022-8-9
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  菌落計數(shù)器可減輕實驗人員的勞動強度,提高工效,提高工作質(zhì)量,廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗。是各級隆重防疫站、環(huán)境監(jiān)測站、食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所、醫(yī)院、生物制品所、藥檢所、商檢局、食品廠、飲料廠、化妝品廠、日化廠及大專院校、科研單位實驗室的儀器。
  菌落計數(shù)的操作流程
  樣品的稀釋
  固體和半固體樣品
  稱取25 g置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi),8000 r/min~10000 r/min均質(zhì)1min~2 min,或放入盛有225 mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2 min,制成1:10的樣品勻液。
  液體樣品
  以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。
  上步完成后,用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。
  培養(yǎng)和計數(shù)
  樣品稀釋完成后,就要進(jìn)行培養(yǎng)和菌落計數(shù)了
  待瓊脂凝固后,將平板翻轉(zhuǎn),36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。
  如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時,可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基 (約4mL),凝固后翻轉(zhuǎn)平板,按相同條件進(jìn)行培養(yǎng)。
  培養(yǎng)完成后,就要進(jìn)行菌落計數(shù)了,計數(shù)可用肉眼觀察,必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器,記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位表示。
  大片菌落
  其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù);若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2,代表一個平板菌落數(shù)。
  鏈狀生長
  當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明
  顯界線的鏈狀生長時,則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。

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