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肝細胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是近年來發(fā)病率急劇上升的惡性腫瘤之一。肝癌細胞系廣泛應用于各類肝癌的研究。肝癌細胞系的基因組與健康人細胞系的基因組不同。常見的人肝癌細胞系有PLC、Huh7、Huh7.5、Hep3B、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-H、MHCC9-L等,每一種細胞系都有自己的特點,由于它們具有與原代肝癌細胞相似的生物學特性,無生物學改變、特性穩(wěn)定、無限制傳代,為肝癌研究提供了理想的體外模型,成為除動物實驗外肝癌疾病研究的又一熱門替代物。
信裕生物為各位老師整理了實驗室常用人肝癌細胞株,如果您正在為選擇哪一款肝癌細胞而困惑的話,此文興許會對您有幫助。
1. HepG2 人肝癌細胞
HepG2細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結合蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體;該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。
HepG2細胞系基因組和表觀基因組相關文獻的結果統(tǒng)計顯示,HepG2肝癌細胞系的基因組序列創(chuàng)造出更高的基因組特征。充分整合了包括CN、SNPs、SNV等在內(nèi)的HepG2細胞系的全基因組特征和基因序列,為其他類似細胞系的全基因組鑒定奠定了基礎。朱利安娜等人發(fā)現(xiàn)β-肌酸對人白細胞的殺傷作用比人肝癌細胞更為明顯。單萜類化合物的肝毒性高于HepG2/C3A細胞,優(yōu)于白細胞。體內(nèi)研究表明β-肌力相關的致癌和致畸效應需要進一步的實驗證實,Arunraj等人發(fā)現(xiàn),復合納米凝膠對HepG2細胞系具有細胞毒性,Dox幾丁質(zhì)PLA CNG系統(tǒng)可能是一種有前途的肝癌抗癌藥物傳遞系統(tǒng)。
人肝癌細胞株HepG2在肝臟生理研究中得到了廣泛應用,但肝特異性藥物代謝酶和轉(zhuǎn)錄因子的表達水平較低。
2. Hep3B 人肝癌細胞
Hep3B細胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細胞產(chǎn)生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg)、白蛋白、巨球蛋白、α-抗胰蛋白酶(alphal-antitrypsin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補體(C3)、C3活性載體,纖維原等,具有廣泛的研究價值。
Hep3B肝癌細胞cDNA文庫的建立及對Hep3B肝癌細胞的毒性研究,有助于我們更好地了解肝癌,選擇最佳細胞系進行細胞實驗,因此人肝癌Hep3B細胞系長期以來被用于檢測治療藥物的療效、體外細胞毒性、DNA合成和caspase活性。
人肝癌細胞主要來源于肝癌組織。通過培養(yǎng)肝癌細胞,并在單細胞水平上進行分析,可以更詳細地了解肝癌形成的過程,并將其應用于肝癌生物學研究。使用體外系統(tǒng)進行研究的一個優(yōu)點是,它們可以比體內(nèi)研究更快、更便宜。例如,如果你想做肝癌細胞增殖的實驗,你可以選擇HepG2或Hep3B肝癌細胞,而不是花太多時間來選擇它們。HepG2、Huh7和Hep3B的基因組和細胞毒性研究已深入,這些基因?qū)Ω伟┑陌l(fā)展和晚期藥物的開發(fā)具有重要意義。
3. HuH-7 人肝癌細胞
Hidekazu等人于1982年從高分化肝細胞癌患者的組織中分離和培養(yǎng)了Huh 7,但肝細胞癌細胞的遺傳圖譜尚不為公眾所知。Fumio Kasai等人對Huh7肝癌細胞系進行了M-Fish、SNP微陣列序列和序列分析以確定其圖譜,他們發(fā)現(xiàn)高水平的LOH可以增加染色體重排的可能性,Huh7肝癌細胞在培養(yǎng)過程中對遺傳變異高度敏感,另外,不同的代次在體外實驗中可能有不同的表達模式。Malinen等人發(fā)現(xiàn),長期分化的Huh-7細胞系是一種很有希望的體外肝毒性和內(nèi)源性化合物模型,用于藥物檢測等實驗。
Jouan等人發(fā)現(xiàn)HuH-7細胞上調(diào)了一些與法尼醇X受體(FXR)和核因子紅細胞2相關因子2(Nrf2)相關的轉(zhuǎn)運蛋白。這些數(shù)據(jù)表明,在表達一些主要的肝臟藥物轉(zhuǎn)運體時,它可能被用來研究藥物與MRP的相互作用。
應用:人肝癌細胞系Huh7的基因組特征對傳代次數(shù)非常敏感,分化后的Huh7細胞可能適合于研究藥物代謝酶蛋白表達的肝毒性作用,Huh-7細胞系也常用于研究肝細胞癌的發(fā)病機制,它是一種方便、廉價的替代人肝細胞的方法。
4. MHCC97H 人肝癌細胞
該細胞系由上海醫(yī)科大學中山醫(yī)院建立, 將一名我國39歲男性HCC患者的肝右葉轉(zhuǎn)移病灶的手術切除標本接種于裸鼠肝內(nèi)建造出人肝癌裸鼠轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)而得。已證實, 經(jīng)過再次分離得到的MHCC97H、MHCC97L及HCCLM33種細胞株,依據(jù)它們的轉(zhuǎn)移特點,雖來源同一父系,但具有異質(zhì)性,即具有不同的轉(zhuǎn)移潛能。
MHCC97人肝癌細胞系于1998年從裸鼠人肝癌轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)體外傳代培養(yǎng)獲得,該細胞系符合一般人惡性腫瘤的病理學和遺傳學特征,細胞呈上皮樣,貼壁生長,血清HBsAg、AFP高表達,成瘤率高且優(yōu)先轉(zhuǎn)移的靶器官是肺,肺轉(zhuǎn)移率100%,故證實該細胞系為高轉(zhuǎn)移特性的人肝癌細胞系。
2001年,研究者從MHCC97細胞系中發(fā)現(xiàn)并分離出不同轉(zhuǎn)移潛能的2個細胞系MHCC97-H和MHCC97-L,前者肺轉(zhuǎn)移率100%,后者40%;從生長速度上,前者細胞倍增時間較后者短;穿透人工基底膜能力前者較后者大;前者均較后者活力強、代謝旺。傳代至20代后,兩種形態(tài)學特征及生長速度方面均較穩(wěn)定。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉(zhuǎn)移潛能的HCCLM3細胞系。
5. PLC/PRF/5 人肝癌亞力山大細胞
PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細胞于1976年建系, 細胞來自一位患有原發(fā)性HCC的莫桑比克男性患者的標本; 為上皮樣貼壁生長; AFP陽性, 不產(chǎn)生白蛋白; 分泌ad亞型的HBsAg而不產(chǎn)生HBcAg或HBeAg和Dane顆粒, 卻可維持HAV的繁殖; 該細胞可能含有全部HBV基因組, 同工酶譜及核型與人類同源;裸鼠異種移植可致瘤. 此細胞系因其產(chǎn)生HBsAg的物理化學和免疫化學特性跟HBV攜帶者血清中HBsAg相似, 因此, 可被用來研究HBV體外病毒及其與原發(fā)性肝癌的關聯(lián), 抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備及Antiviral drugs的制備等方面。
人肝癌細胞系優(yōu)點
(1) 在選擇實驗對象的比較上,人肝癌細胞系相較于人原代肝細胞,克服了人原代肝細胞來源困難、實驗難控制、存活時間短的局限,肝癌細胞系為已獲得的穩(wěn)定傳代的細胞,具有來源方便、操作簡單、條件可控和可重復等優(yōu)點,是用于肝癌疾病相關研究的理想對象。
(2) 肝癌細胞系均選擇來源于確診肝癌患者的病理組織,具有與肝癌患者體內(nèi)相似的遺傳基因組,其發(fā)生發(fā)展機制、功能蛋白表達、病毒復制能力、侵襲轉(zhuǎn)移功能及抗藥性等,具有與人類親源體極其相近的特點,因此更適合應用于肝癌各領域的研究。
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