利用抗原親和純化多抗問題

首先，western blot不能用來說明抗體效價(jià)，而需要在嚴(yán)格確定抗原濃度的情況下，通過ELISA等實(shí)驗(yàn)來說明。因?yàn)閃B檢測(cè)的抗原蛋白是一種變性伸展的狀態(tài)，而非活性狀態(tài)；
第二，1:200的抗血清稀釋度（甚至1:20）可以得到背景較小的條帶，你的實(shí)驗(yàn)可能需要充分washing及blocking，以減少非特異性吸附。
第三，不知你用什么方法染色？注意時(shí)間不要太長(zhǎng)，能看到你的條帶即可，一般用DAB染色不超過5min（2～3min，37 C）。