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導致ELISA測定過失的三大要素
導致ELISA測定過失作用的要素主要有三大要素:標本要素;試劑要素;操作要素。
ELISA試劑盒的基本原理使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體外表,并堅持其免疫活性;使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標抗原(或抗體),并且此酶標抗原(或抗體)既保存其免疫活性,又保存其酶活性;測守時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同進程與固相載體外表的抗原或抗體進行反響。
再用洗刷辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復合物與其它物質(zhì)分隔,畢竟結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成必定份額;再參加酶反響底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)品,根據(jù)其色彩反響的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。
ELISA試劑盒辦法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但elisa試劑盒測定中影響要素較多,并且其操作中有必定的技能懇求,在臨床查驗中除正常反響外,有時??梢姷揭恍┻^失作用(即假陽性或假陰性作用)。
血清是zui常用的ELISA標本,血漿一般可視為與血清對等的標本,標本導致的假陽性和假陰性作用主要是干擾性物質(zhì)所構(gòu)成的,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1、內(nèi)源性物質(zhì)
有人以為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響查看作用。多見的干擾物質(zhì)有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
2、外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒的測定血標本的收集、儲存等不妥所構(gòu)成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
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