黄色亚洲色图,久久精品人人做人人看,木耳视频在线

供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0068	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

禽白血病病毒通用RT-PCR試劑盒

Avian Leukosis Virus(ALV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

禽白血病(Avian Leukosis)是由禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus， ALV）引起的多種腫瘤性疾病的統(tǒng)稱(chēng)，這些疾病主要是淋巴白血病，其次是成紅細(xì)胞白血病等?；茧u不但產(chǎn)生淋巴樣腫瘤，其產(chǎn)蛋量還將下降。由于該病以垂直傳播為主，故難以控制。它還使患雞抵抗力下降后，容易感染多種其它疾病，給雞群的飼養(yǎng)管理帶來(lái)困難，所以禽白血病一直被認(rèn)為是嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的重要的禽病之一。禽白血病病毒屬于反錄病毒科禽 C 型反錄病毒群，它還常常污染禽用疫苗、犬用疫苗，甚至人用疫苗，給生物制品工業(yè)、醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究方面也造成巨大危害。本產(chǎn)品根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)，可用于科研領(lǐng)域快速檢測(cè)禽白血病病毒。它具有下列特點(diǎn)：

1. 一站式，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分，包括引物和對(duì)照。

2. 根據(jù)禽白血病病毒通用的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物，具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng)。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。

禽白血病病毒通用RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	200 μL（橘黃蓋））
試劑二	MMLV-Taq Mix	75 μL（紅蓋）
試劑三	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑四	禽白血病病毒通用 RT-PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑五	禽白血病病毒通用 RT-PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1 ×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月。收到貨后陽(yáng)性對(duì)照需要跟其他成分分開(kāi)放置，因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞?，造成假?yáng)性。

自備試劑 樣品RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 禽傳染支氣管炎病毒通用 RT-PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 100 倍稀釋的（稀釋后濃度為 1×10E6 拷貝/μL， 10μL 相當(dāng)于 1 萬(wàn)拷貝，可以將 10μL 原液加入到 990μL 自備 TE 溶液中，充分混勻，此為 100 倍稀釋液。）再加上一定量的水作為制備的陽(yáng)性對(duì)照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）?？梢杂?水作為制備的陰性對(duì)照。制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容。

二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個(gè)樣品，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管（額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽(yáng)性對(duì)照，另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對(duì)照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成分	N+2個(gè)制備所得樣品	RT-PCR陰性對(duì)照	RT-PCR 陽(yáng) 性對(duì)照管
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	各4 μL	4 μL	4 μL
禽白血病病毒通用 RT-PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2 個(gè)制備的 RNA 樣品)	各12.5 μL
超純水		12.5 μL
禽白血病病毒通用 RT-PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋液			12.5 μL
MMLV-Taq Mix	1.5 μL	1.5 μL	1.5 μL

4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過(guò)程	溫度	時(shí)間
逆轉(zhuǎn)錄	42℃	30 min
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR 反應(yīng) （35 個(gè)循環(huán)）	95℃	30 sec
	54℃	30 sec
	72℃	40 sec
延伸	72℃	7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測(cè)擴(kuò)增效果。如果陰性對(duì)照有擴(kuò)增產(chǎn)物或陽(yáng)性對(duì)照無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物，則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)失敗，需要分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因。只有在陰性對(duì)照沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物、陽(yáng)性對(duì)照有預(yù)期擴(kuò)增產(chǎn)物的情況下，才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如果有預(yù)期 674bp 大小的擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽(yáng)性，如果無(wú)則為陰性。