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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0149	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

牛細(xì)小病毒PCR試劑盒

Bovine Parvovirus (BPV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

牛細(xì)小病毒(Bovine Parvovirus,BPV) 會(huì)引發(fā)牛細(xì)小病毒感染，是一種接觸性傳染病,以下痢為主要癥狀,其特征是母牛生殖機(jī)能障礙，導(dǎo)致妊娠母牛感染導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎，犢牛感染則表現(xiàn)腸炎、腹瀉。牛細(xì)小病毒感染在牛群中發(fā)生比較廣泛，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究的較少,發(fā)生此病的國(guó)家也不多，因此檢測(cè)牛細(xì)小病毒 DNA具有重要意義。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：

1.即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供病毒DNA模板。
2.引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專(zhuān)一性強(qiáng)，只擴(kuò)增牛細(xì)小病毒，與其他病毒沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3.提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。

牛細(xì)小病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（亮黃蓋）
試劑二	超純水	1 mL（藍(lán)色）
試劑三	牛細(xì)小病毒 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	牛細(xì)小病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑	50次（9 mL）
試劑六	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	樣品管 N+2 個(gè)	PCR 陰性對(duì)照管	PCR 陽(yáng)性對(duì)照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μLL
牛細(xì)小病毒PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對(duì)照（水）		18 μL
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（牛細(xì)小病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋液）			18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個(gè)循環(huán)）	95℃	45 sec
	54℃	45 sec
	72℃	30 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。