欧美一级一片,欧美射图青榴网,黄色四房

供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0234	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒

Cryptosporidium serpentis

產(chǎn)品及特點(diǎn)

蛇形隱孢子蟲（Cryptosporidium serpentis）感染發(fā)生在爬行動物，特別是蛇。本病以慢性感染為特征，伴有肥厚性胃炎。新生或幼齡動物，對隱孢子蟲呈高度易感性,但并非所有感染都引起急性發(fā)病。正常機(jī)體,常呈自限性或亞臨床感染或無癥狀感染。但在免疫功能低下或受損患者，其可迅速繁殖,使病情惡化,成為死因。因此快速準(zhǔn)確診斷蛇形隱孢子蟲具有重要意義。為此本公司基于 PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板。

2. 根據(jù)蛇形隱孢子蟲保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與其他微生物無交叉反應(yīng)

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑三	蛇形隱孢子蟲PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	蛇形隱孢子蟲 PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
蛇形隱孢子蟲PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板	各 18 μL
樣品制備陰性對照（超純水）		18 μL	-
蛇形隱孢子蟲 PCR 的 1 千倍稀釋液	-		18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個循環(huán)）	95℃	15 sec
	55℃	15 sec
	72℃	60 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。