貓皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒

Feline Herpesvirus type 1 (FHV-1)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

貓皰疹病毒 1 型（Feline Herpesvirus type 1，F(xiàn)HV-1）屬于皰疹病 毒科中的α-皰疹病毒，是貓病毒性鼻氣管炎的病原，可引起貓及其他貓科動(dòng)物 的眼病及呼吸道疾病。貓皰疹病毒會(huì)在結(jié)膜及上呼道上皮細(xì)胞內(nèi)和神經(jīng)元細(xì)胞 內(nèi)復(fù)制增殖，神經(jīng)原的感染會(huì)導(dǎo)致終身潛伏感染。慢性潛伏感染是貓皰疹病毒 急性感染后的典型結(jié)果，井且間歇性地再活化，排放病毒于口鼻分泌物及結(jié)膜 分泌物。因此快速靈敏檢測貓皰疹病毒 1 型具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目 的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增貓皰疹病毒 1 型，與其他病毒沒有 交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

貓皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑   樣品 DNA。

使用方法一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和 一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要 求的樣品起始量）中加 10μL 斑點(diǎn)叉尾鮰病毒 PCR 陽性對(duì)照的 1 萬倍稀 釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。陽性對(duì)照 必須有條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增 產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染