庚型肝炎病毒PCR試劑盒

Hepatitis G Virus(HGV)

產(chǎn)品及特點

庚型肝炎病毒(Hepatitis G Virus，HGV)會引發(fā)肝炎，和乙型肝炎病毒相 似，主要經(jīng)輸血等非腸道途徑傳播，也可存在母-嬰傳播和醫(yī)源性傳播。單獨感 染時臨床癥狀不明顯，一般不損害肝臟。主要特征有：過性病毒血癥呈隱性感 染；急性肝炎 ALT 升高，黃疸比急性丙肝輕，多數(shù)很快恢復可與乙、丙肝病毒 合并感染；病毒持續(xù)存在病毒始終處于低滴度狀態(tài)，少數(shù)高滴變，但常無臨床 癥狀；病情遷延隨著病毒滴度的波動，ALT 間歇性增高，少數(shù)反復發(fā)作轉成慢 性肝炎；可能引起暴發(fā)性肝炎以亞急性重型肝炎多見；肝硬化感染病毒后演變 成肝硬化需較長時間，一旦硬化，病情即急轉直下，發(fā)展迅速；肝癌少數(shù)換者 也可發(fā)展成肝癌，與乙、丙肝病毒有協(xié)同作用。該病毒對人體生命健康造成嚴 重損害，因此快速靈敏檢測庚型肝炎病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是根據(jù)庚型 肝炎病毒保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品，它具有下列特 點：

1. 即開即用，只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增庚型肝炎病毒，與其他病原沒有交 叉反應。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

庚型肝炎病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。