組織胞漿菌通用PCR試劑盒

Histoplasm spp.

產(chǎn)品及特點

組織胞漿菌(Histoplasm spp)會引起組織胞漿菌病，是一種在世界范圍內(nèi)廣泛流行的傳染病，尤其是以嬰幼兒和老年人多見，男性發(fā)病率高于女性，臨床表現(xiàn)有原發(fā)性肺部感染、播散性感染等，原發(fā)性肺部感染常表現(xiàn)為發(fā)熱、頭疼、全身不適和干咳，嚴重者會出現(xiàn)低氧血癥和呼吸衰竭，播散性感染常有發(fā)熱、體重下降、全身不適、肝脾腫大等癥狀，罕有伴發(fā)肺病變等癥狀，該細菌的感染對人體健康造成嚴重損害，因此快速檢測組織胞漿菌通用具有重要意義。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開發(fā)，它具有下列特點：

1. 即開即用，只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增組織胞漿菌通用。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

組織胞漿菌通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。