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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次人類嗜T淋巴細胞病毒2型RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品型號50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時間:2020-08-03 16:22:46瀏覽次數(shù):492次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0412 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
人類嗜T淋巴細胞病毒2型RT-PCR試劑盒
Human T-cell Lymphoma Virus 2(HTLV-2)
產(chǎn)品及特點
人類嗜 T 淋巴細胞病毒 2 型(Human T-lymphotropic Virus 2,HTLV-2) 是一種感染后可導(dǎo)致血癌或其他轉(zhuǎn)移癌的 RNA 病毒,HTLV-2 和 HTLV-I 同源性 達到 70%,也是愛滋病毒 (HIV-I) 的遠親。該病毒在體內(nèi)主要感染 CD4+ T 淋巴 細胞,可引起成人 T 淋巴細胞白血病/淋巴瘤等疾病,主要通過輸血、針頭、性行 為、母子傳染,對人類健康構(gòu)成威脅,因此快速靈敏檢測 HTLV-2 病毒具有重要 意義。本試劑盒根據(jù) RT-PCR 原理開發(fā),它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶不需要單獨準備各種成分。
2. 根據(jù) HTLV-2 保守序列設(shè)計,專一性強。
3. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成,不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。
4. 提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照,便于分析實驗結(jié)果。
5. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品足夠 50 次 30μL 體系的 RT-PCR。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床
人類嗜T淋巴細胞病毒2型RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成 份 | 規(guī)格 |
試劑一 | 5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL(橙蓋) |
試劑二 | MMLV-Taq Mix | 75 μL(紅蓋) |
試劑三 | 超純水 | 1 mL(藍蓋) |
試劑四 | HTLV-2 RT-PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑五 | HTLV-2 RT-PCR 陽性對照(1× 10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋) |
試劑六 | 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) | 20 次(1mL,綠蓋) |
試劑七 | 使用手冊 | 1 份) |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。
自備試劑 樣品 RNA
使用方法 一、樣品 RNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設(shè)置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照;用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。
2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。
二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系)
3. 如果有 N+2 個樣品,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:
成分 | 樣品 | 陽性對照 | 陰性對照 |
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer | 各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
HTLV-2 RT-PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
N+2 個制備的 RNA 樣品 | 各12.5 μL |
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HTLV-2 RT-PCR 陽性對照 10000 倍稀釋液 |
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| 12.5 μL |
MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
4. 上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:
過程 | 溫度 | 時間 |
逆轉(zhuǎn)錄 | 42℃ | 30 分鐘 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 分鐘 |
PCR 反應(yīng) (35 個循環(huán)) | 95℃ | 40 秒 |
55℃ | 30 秒 | |
72℃ | 40 秒 | |
延伸 | 72℃ | 5 分鐘 |
5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物, 則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物、 陽性對照有 122bp 預(yù)期的擴增產(chǎn)物的情況下,才有必要分析樣品的實驗結(jié)果, 如果有擴增產(chǎn)物則為陽性,如果無則為陰性。
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