分枝桿菌屬通用PCR試劑盒

Mycobacterium spp.

產品及特點

分枝桿菌屬（Mycobacterium spp.）是一類細長略彎曲的，有時有分枝 或出現(xiàn)絲狀體。本屬細菌的主要特點是細胞壁含有大量脂質，主要是分枝菌酸。 這和其染色性、生長特性、致病性、抵抗力等密切相關。一般不易著色，若經 加溫或延長染色時間而著色后能抵抗強脫色劑鹽酸乙醇的脫色，故又稱抗酸桿 菌。該菌屬無鞭毛、無芽胞、不產生內、外毒素，其致病性和菌體成分有關。 引起的疾病都呈慢性，并伴有肉芽腫。分枝桿菌種類較多，對人致病的主要有 結核分枝桿菌和麻風分枝桿菌。因此快速靈敏檢測分枝桿菌具有重要意義。本 產品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增分枝桿菌，與其他微生物沒有交叉 反應。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

分枝桿菌屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。