絲狀支原體山羊亞種PCR試劑盒

Mycoplasma mycoidessubsp(capri)

產(chǎn)品及特點

羊傳染性胸膜肺炎又稱羊支原體性肺炎，是由支原體所引起的一種高度接 觸性傳染病，其臨床特征為高熱，咳嗽，胸和胸膜發(fā)生漿液性和纖維素性炎癥， 取急性和慢性經(jīng)過，病死率很高。引起山羊傳染性胸膜肺炎的病原體為絲狀支 原體山羊亞種，為細小、多變性的微生物，革蘭氏染色陰性。在自然條件下， 絲狀支原體山羊亞種只感染山羊，3 歲以下的山羊易感染，而綿羊肺炎支原 體則可感染山羊和綿羊。本病常呈地方流行性，接觸傳染性很強，主要通過空 氣-飛沫經(jīng)呼吸道傳染。陰雨連綿，寒冷潮濕，羊群密集、擁擠等因素，有利于 空氣-飛沫傳染的發(fā)生；多發(fā)生在山區(qū)和草原，主要見于冬季和早春枯草季節(jié)， 羊只營養(yǎng)缺乏，容易受寒感冒，因而機體抵抗力降低，較易發(fā)病，發(fā)病后病死 率也較高。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)檢測絲狀支原體山羊亞種的試劑盒，它 具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增絲狀支原體山羊亞種，與其他微生 物沒有交叉反應(yīng)。 

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

絲狀支原體山羊亞種PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。