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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次幼蟲(chóng)芽孢桿菌PCR試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-08-10 15:16:41瀏覽次數(shù):404次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號(hào) | XY-0547 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。 |
幼蟲(chóng)芽孢桿菌PCR試劑盒
Paenibacillus larvae
產(chǎn)品及特點(diǎn)
美洲幼蟲(chóng)腐臭病 (American foulbrood , AFB) 是 由 幼蟲(chóng)芽孢桿菌 (Paenibacillus larvae)引起的蜜蜂幼蟲(chóng)和蛹的一種細(xì)菌性、急性、毀滅性傳 染病,其典型癥狀為封蓋后死亡的幼蟲(chóng)巢房蓋變潮濕、下陷、顏色發(fā)暗并顯 油光,大部分巢房蓋穿孔,患病幼蟲(chóng)蟲(chóng)體變軟,失去正常白色和光澤,逐漸 變成淡褐色至棕黑色。AFB 一旦在蜂場(chǎng)發(fā)生,極易造成幼蟲(chóng)死亡和蜂群群勢(shì) 衰弱,且很難*清除,給養(yǎng)蜂業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE) 將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病,我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病和進(jìn)境動(dòng)物檢疫疫 病。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的幼蟲(chóng)芽孢桿菌檢測(cè)試劑盒,它具有下列特 點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)幼蟲(chóng)芽孢桿菌,與其他病原沒(méi)有交叉 反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
幼蟲(chóng)芽孢桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃色)) |
試劑三 | 幼蟲(chóng)芽孢桿菌 PCR 引 物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 幼蟲(chóng)芽孢桿菌 PCR 陽(yáng) 性對(duì)照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
|
試劑五 | 使用手冊(cè) | 1 份 |
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個(gè)樣品,必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此 作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取 試劑盒兼容。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個(gè) 樣品管 | PCR陰性對(duì)照 | PCR陽(yáng)性對(duì)照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
幼蟲(chóng)芽孢桿菌PCR 引物 混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對(duì)照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 陽(yáng)性對(duì)照(幼蟲(chóng)芽孢桿菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過(guò)程 | 溫度 | 時(shí)間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應(yīng) (35個(gè)循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 20 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測(cè)
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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