兔巴氏桿菌PCR試劑盒

Parvovirus B19(PVB19)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

兔巴氏桿菌病兔巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的，家兔中較常發(fā)生， 一般無季節(jié)性，以冷熱交替、氣溫驟變，悶熱、潮濕多雨季節(jié)發(fā)生較多。病兔 的糞便、分泌物可以不斷排出有毒力的病菌，污染飼料、飲水、用具和外界環(huán) 境，經(jīng)消化道而傳染給健康兔，或由咳嗽、噴嚏排出病菌，通過飛沫經(jīng)呼吸道 而傳染，吸血昆蟲的媒介和皮膚、粘膜的傷口也可發(fā)生傳染。臨診特征是鼻炎、 地方流行性肺炎、全身性敗血癥、中耳炎、結(jié)膜炎、子宮積膿、睪丸炎等不同 病型。此病是引起 9 周齡-6 月齡兔死亡的一種主要的傳染病。本產(chǎn)品就是為 此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)： 

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增兔巴氏桿菌，不跟其他病毒發(fā)生 交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研

兔巴氏桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月。

自備試劑   樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。