牙齦卟啉單胞菌PCR試劑盒

Porphyromonas gingivalis

產(chǎn)品及特點(diǎn)

牙齦卟啉單胞菌（Porphyromonas gingivalis）是一種非酵解糖的革蘭氏 陰性厭氧球桿菌，是研究廣泛且證據(jù)充足的重要牙周炎致病菌之一。它不僅可 以引發(fā)牙周炎，還能導(dǎo)致現(xiàn)在常見的抗生素抗性。它會(huì)把對(duì)牙齒有益的細(xì)菌擠 兌走，并取代它們的位置。牙齦卟啉單胞菌一旦失控，它終會(huì)導(dǎo)致牙齒從牙 齦上脫落下來。國(guó)外有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn) 37%的 0～18 歲個(gè)體中均可檢測(cè)到牙齦 卟啉單胞菌，是人類健康的重大威脅。因此對(duì)牙齦卟啉單胞菌進(jìn)行快速靈敏的 診斷具有重要的意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有 下列特點(diǎn)： 

1. 即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增牙齦卟啉單胞菌，但跟其他微生物 無交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

牙齦卟啉單胞菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。