當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次雞白痢沙門氏菌PCR試劑盒
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0650 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
雞白痢沙門氏菌PCR試劑盒
Salmonella pullorum
產品及特點
雞白痢沙門氏菌(Salmonella pullorum)是一種急性、系統(tǒng)性疾病,主 要危害 1 周齡以內雛雞,造成高死亡率;成年雞無明顯病變,多數呈隱形感染。 雞白痢沙門氏菌病的潛伏期短,雛雞一般為 2—3 天,有時僅為 1 天。出殼后 第 2 天就開始死亡,病雞精神萎頓,縮頭頸,閉眼昏睡,絨毛松亂,初期病雞 僅表現食欲減少,繼而不食;腹瀉,排白色稀漿樣糞便,有糊堵肛門現象;嚴 重者因呼吸困難或急性敗血癥而死亡。因此快速靈敏檢測雞白痢沙門氏菌具有 重要意義。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發(fā)的試劑盒,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2.引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增雞白痢沙門氏菌,與其他微生物沒 有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
雞白痢沙門氏菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 雞白痢沙門氏菌 PCR 引物混合 液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 雞白痢沙門氏菌PCR 陽性對照(1 ×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑試用裝 | 20 次(1mL,綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽 性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此 作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
雞白痢沙門氏菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 陽性對照(雞白痢沙門氏菌 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應:
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應 (35個循環(huán)) | 95℃ | 15 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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