沙門氏菌通用PCR試劑盒

Salmonella spp.

產(chǎn)品及特點(diǎn)

沙門氏菌屬通用（Salmonella spp.）是一種常見的食源性致病菌引起沙 門氏菌病的，屬腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。按其抗原成分，可分為甲、 乙、丙、丁、戊等群。其中與人體疾病有關(guān)的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙 組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的 傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引起人類 的疾病外，大多數(shù)僅能目引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病，但有時(shí)也可污 染人類的食物而引起食物中毒。引起的中毒病例在世界各地的食物中毒病例中 所占數(shù)量比例非常高。在我國，70-80%細(xì)菌性食物中毒事件是由沙門氏菌引 起的，沙門氏菌的檢測已成為食品質(zhì)量安全監(jiān)控的必檢衛(wèi)生指標(biāo)。因此快速靈 敏檢測沙門氏菌具有重要的意義，本試劑盒就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)， 它具有下列特點(diǎn)： 

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增沙門氏菌，包括甲到戊群的沙門氏 菌。但跟非沙門氏菌無交叉反應(yīng)。 

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

沙門氏菌通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽 性對照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。