血吸蟲通用PCR試劑盒

Schistosoma spp.

產(chǎn)品及特點

血吸蟲（Schistosoma spp.）會引起血吸蟲病，該病主要通過皮膚，黏膜與疫水接觸受染。患病后，侵襲期患者可有咳嗽、胸痛、偶見痰中帶血絲等癥狀，急性期臨床上常會出現(xiàn)發(fā)熱、痢疾樣大便且帶血和黏液、肝脾大、咳嗽、胸痛，血痰等癥狀，慢性期多因急性期未曾發(fā)現(xiàn)，未治療或治療不*，或多次少量重復感染等原因，逐漸發(fā)展而成，晚期病人極度消瘦，出現(xiàn)腹水、巨脾，腹壁靜脈怒張等晚期嚴重癥狀。感染該病對人體健康造成嚴重損害，因此血吸蟲檢測具有重要的意義。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開發(fā)，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增血吸蟲通用。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

血吸蟲通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。