猴病毒40 PCR試劑盒

Simian Virus 40(SV40)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

SV40 是猴病毒 40（Simian Virus 40）的縮寫，其基因組是一種環(huán)形雙 鏈的 DNA，基因組 5.2kb。SV40 在體外可使人及動物多種組織類型的正常細(xì) 胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)可誘發(fā)多種腫瘤形成，并且人類許多腫瘤 的發(fā)生也與之有關(guān)。SV40 和 BK 病毒（BKV，BK Virus）、JK 病毒（JKV， JK Virus）等病毒的生物學(xué)特性各不相同，但由于新生的小鼠、大鼠、倉鼠、 家兔、豚鼠等對這些病毒都特別敏感，多個(gè)部位或器官會發(fā)生肉瘤或癌癥，故 又通稱多瘤病毒(Polyoma Virus)。本產(chǎn)品就是專門用于檢測 SV40 的高靈敏 熒光定量 PCR 檢測方法，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增 SV40 病毒，與其他病毒沒有交叉 反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

猴病毒40 PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽 性對照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。