桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒

Taura Syndrome Virus(TSV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

桃拉綜合癥病毒(Taura Syndrome Virus, TSV)會(huì)引起桃拉綜合征病毒病， 病蝦不吃食或少量吃食，在水面緩慢游動(dòng)，在特急性到急性期，幼蝦身體虛弱， 外殼柔軟，消化道空無食物，在附足上會(huì)有紅色的色素沉著，尤其是尾足、尾節(jié)、 腹肢，有時(shí)整個(gè)蝦體體表都變成紅色。較大規(guī)格的病蝦步足末端有蛀斷、潰瘍現(xiàn) 象，兩根觸須、尾扇、胃腸道均變紅，胃腸道腫脹（腸內(nèi)有少量食物），肝胰臟 腫大，變白。該病毒主要感染南美白對(duì)蝦，主要發(fā)生在蝦的蛻皮期，我國由于引 進(jìn)南美白對(duì)蝦并進(jìn)行了規(guī)模養(yǎng)殖，該病在南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖密集區(qū)中已有發(fā)現(xiàn)，因 此桃拉綜合癥病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。。為此本 公司開發(fā)了本產(chǎn)品，可用于在科研領(lǐng)域快速定量檢測桃拉綜合癥病毒。它具有下 列特點(diǎn)：

1. 一站式，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分，包括引物和對(duì)照。

2. 根據(jù)桃拉綜合癥病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物，具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng)。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成，不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。

桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月。收到貨后陽性對(duì)照需要跟其他成分 分開放置，因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞?，造成假陽性?nbsp;

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽性 對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對(duì)照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對(duì)照；用水作為制備的陰性對(duì)照。 制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個(gè)樣品，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管（額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽性對(duì)照，另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對(duì)照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分：

4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

5. 瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增效果。如果陰性對(duì)照有擴(kuò)增產(chǎn)物或陽性對(duì)照無擴(kuò)增產(chǎn)物， 則說明實(shí)驗(yàn)失敗，需要分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因。只有在陰性對(duì)照沒有擴(kuò)增產(chǎn)物、 陽性對(duì)照必須有 231bp 的條帶出現(xiàn)，才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如果有 預(yù)期片段大小的擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽性，如果無則為陰性。