亮熱厲螨（小蜂螨病）PCR試劑盒

Tropiladaps clareae

產(chǎn)品及特點(diǎn)

亮熱厲螨 (Tropiladaps clareae) 又 叫 小蜂螨 ， 引 起 蜜 蜂 的 蜂 螨 病 （acariasis of bees），可以使蜜蜂的幼蟲和蛹嚴(yán)重受害，它不但可以使幼蟲大 批死亡，腐爛變黑，而且也可使蛹和新出房的幼蟲變得殘缺不全，蜂群中可見 子脾上有不少的巢房蓋被咬破，有的幼蟲未化成蛹就死，有的化蛹后不能羽 化，有的羽化出房時(shí)，翅膀殘缺不全，幼蜂發(fā)育不良，在巢門前或場(chǎng)地上亂爬。 螨病嚴(yán)重的蜂群，由于新蜂不能產(chǎn)生，成年蜂大批死亡，蜂群迅速削弱、甚至 全群覆滅。因此快速準(zhǔn)確診斷亮熱厲螨具有重要意義。為此本公司基于 PCR 原 理開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)： 

1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板。

2. 根據(jù)亮熱厲螨保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與其他微生物無交叉反應(yīng)

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

亮熱厲螨（小蜂螨?。㏄CR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。