小膠質(zhì)細(xì)胞特異性抗體
兔源Iba1抗體,無標(biāo)簽
Iba1是在巨噬細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞中特異性表達(dá)的分子量為17,000的鈣結(jié)合蛋白。近來小膠質(zhì)細(xì)胞備受關(guān)注,除了在神經(jīng)營養(yǎng)/神經(jīng)保護中起作用外,也已被證實通過產(chǎn)生NO,TNF-α和IL-1β對神經(jīng)造成損傷。
該產(chǎn)品是與小膠質(zhì)細(xì)胞特異性反應(yīng)的兔多克隆抗體,適用于與星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性抗GFAP單克隆抗體進(jìn)行雙染色。
◆特點
●抗原:對應(yīng)于Iba1的C末端的合成肽
●形式:TBS溶液(1 mg/mL)
●純化:兔抗血清的抗原親和層析純化
●特異性:對小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞具有特異性,但不與神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)。
與人類,小鼠大鼠Iba1反應(yīng)。
●用法:
1.抗Iba1,兔(免疫細(xì)胞化學(xué))適用于免疫細(xì)胞化學(xué)。1-2 μg/mL使用
2.抗Iba1,兔(用于Westernblotting)適合于Western blotting(免疫印跡)。0.5-1 μg/mL使用。
◆應(yīng)用
大鼠原代混合培養(yǎng)細(xì)胞雙染色和相同視野的相位圖像
◆免疫印跡實驗
◆推薦準(zhǔn)備工作
a)石蠟切片
1.脫蠟
100%二甲苯10分鐘,2次
⇓
100%乙醇5分鐘,2次
⇓
80%乙醇5分鐘
⇓
70%乙醇5分鐘
⇓
dH2O,5分鐘,2次
2.用0.01M PBS洗滌,2次
3.在0.3%H2O2的甲醇溶液中孵育30分鐘
4.用0.01M PBS洗滌,3次
5.室溫(RT)下用封閉緩沖液(1.5%正常山羊血清和0.001M PBS的1%BSA)孵育2小時。
6.4℃下在封閉緩沖液中與抗Iba1抗體(0.5 μg/mL)(Wako目錄號019-19741)孵育過夜。
7.用0.01M PBS洗滌,3次。
8.與生物素化的抗兔IgG抗體(1:200)在封閉緩沖液中室溫孵育1小時。
9.用0.01M PBS洗滌,3次。
10.室溫下與Elite ABC試劑(0.01M PBS中的試劑A(1:50)和試劑B(1:50))孵育1小時。
11.用0.01M PBS洗滌,3次
12.在過氧化物酶溶液中孵育(0.05M Tris緩沖液的0.01%過氧化氫和0.05%DAB)
◆實驗步驟鏈接
b)冰凍切片
冷凍的小鼠腦組織或培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)用4%多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制備組織切片。制備后,將組織切片和培養(yǎng)的細(xì)胞用抗Iba1抗體免疫染色。
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
019-19741 | 抗Iba1,兔(免疫細(xì)胞化學(xué)) | 免疫化學(xué) | 50 μg |
016-20001 | 抗Iba1,兔(用于免疫印跡) | 免疫化學(xué) | 50 μg |
兔源Iba1抗體,無標(biāo)簽