詳細介紹
組織分散酶 DISPASE® I、DISPASE® II
DISPASE® 是切斷肽鏈的中性、非極性氨基酸N 末端的金屬蛋白酶,能夠把上皮細胞從組織上剝離成片狀。以前技術人員一直把它用于原代培養(yǎng)的細胞分離以及分散。近年,在再生醫(yī)學和組織工程的領域上也有廣泛應用,可以和膠原酶配合使用。此酶分離細胞迅速有效又溫和,細胞能保持完整,不會給細胞膜帶來傷害,無動物源原料,不含支原體或動物病毒污染,對于血清成分、酶濃度、處理事件、溫度、pH非常穩(wěn)定。
DISPASE®Ⅰ | DISPASE® Ⅱ | |
特性 | 結(jié)晶酶,無菌產(chǎn)品 | 粉末酶,非無菌產(chǎn)品 |
包裝 | 6小瓶 | 1 g |
酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
添加劑等 | 含有醋酸鈣 | 含有糊精和醋酸鈣 |
儲存·有效期 | 生產(chǎn)后在2~10℃下可儲存2年(未開封); 開封溶解后請凍存在-20℃以下,并在6個月內(nèi)使用。 |
◆優(yōu)點、特色
● DISPASE® 是來源于Paenibacillus sp. (舊名:Bacillus polymyxa )的中性金屬蛋白酶。活性中心
● 有Zn2+,比Ca2+ 穩(wěn)定。
● 酶活性幾乎不受血清成分影響,因此不論是否有血清,都可以使用本產(chǎn)品。同時可簡單地通過添加EDTA
● 或者稀釋反應液來停止酶反應。
● 可以很好地分解構(gòu)成基底膜的Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白,讓上皮細胞從組織上剝離成片狀。
● 與胰蛋白酶、膠原酶等蛋白酶的作用不同,造成的細胞損傷更少,可溫和地分散細胞。
● 由于作用條件的范圍廣泛,可以在不同的酶濃度、處理時間、溫度以及pH 條件下,使酶發(fā)生作用。
● 細胞培養(yǎng)溫度一般在37℃,酶在此溫度下非常穩(wěn)定。根據(jù)細胞種類的不同,可以往培養(yǎng)基里添加本產(chǎn)品,
● 進行懸浮培養(yǎng)。
● 本產(chǎn)品不含支原體。
● 本產(chǎn)品沒有使用動物源原料。
◆案例、應用
酶濃度 | 100 ~ 2,000 PU/mL |
溶解液 | 含有Ca2+ 的緩沖液或者培養(yǎng)基(可含有血清) |
反應時間 | 30 分鐘~幾天 |
反應溫度 | 室溫~ 37℃ |
反應pH | 6.5 ~ 9.0 |
抑制因子 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1PU 的定義是使用酪蛋白分解法1 分鐘內(nèi)分離1 微克酪氨酸的酶活性。
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
386-02271 | DISPASE®Ⅰ 分散酶® | 1 g |
383-02281 | DISPASE® Ⅱ 分散酶®Ⅱ | 1 g |