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亮發(fā)光桿菌的活化步驟：配置菌種適宜生長的培養(yǎng)基、將菌種從保藏狀態(tài)恢復(fù)到室溫狀態(tài)、將通過操作將保藏的菌種接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)、挑選培養(yǎng)基茁壯的菌落。

菌種活化就是將菌種保藏中心處于保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，逐級擴(kuò)大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物，即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程，因?yàn)楸４鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國內(nèi)常用的菌種保存方法包括：定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法、液氮超低溫凍結(jié)法。對于不同的保存方式活化的方式也不同：

1、定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡單，直接轉(zhuǎn)接即可；

2、液體石蠟法保存的菌種在復(fù)蘇時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次；

3、沙土管法保存菌種在復(fù)蘇時(shí)，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?；蛉∩惩亮Ｓ谶m宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面；

4、真空冷凍干燥法保存菌種在復(fù)蘇時(shí)先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱，用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現(xiàn)裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上，進(jìn)行適溫培養(yǎng)；

5、-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇時(shí)，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)快速搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)

6、液氮超低溫凍結(jié)法保存亮發(fā)光桿菌復(fù)蘇與-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

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亮發(fā)光桿菌