亮發(fā)光桿菌該法是采用采用成熟的擔孢子萌發(fā)培養(yǎng)成菌絲體而得到純菌種的方法。擔孢子具備親本的遺傳特性，但變異的機會多，生命力強，可能選育出優(yōu)良的菌株。“種茹”的選擇要求與組織分離法一樣，但成熟度要求八九分成熟的金針茹子實體，因為這時的孢子萌發(fā)力強，數(shù)量多，分離之后可供挑選的機會多。孢子分離法有單孢分離與多孢分離兩種方法，馴化育種采用的是多孢子分離法，該法又分為“種茹”孢子彈射法和菌褶貼管壁法兩種。
(1)“種茹”孢子彈射法：取“種茹”切去菌柄，表面用70%的酒精擦洗干凈或浸入0.1%的升水中1~2min，無菌水沖洗數(shù)遍后，用濾紙吸干表面水分。在接種箱或無菌室內(nèi)按無菌操作規(guī)程將“種茹”的菌褶朝下，用鐵絲支撐置于培養(yǎng)皿上，放在消毒擦洗過和大型鐘罩下，把滅菌過的濾紙置于培養(yǎng)皿容器內(nèi)。整個裝置要讓之通氣，否則罩內(nèi)濕度過大，孢子反而不易落下。經(jīng)過12~20h，就可以看到在培養(yǎng)皿內(nèi)或濾紙上散落一層白色的孢子印。用無菌接種環(huán)沾取少量的孢子，置于盛有無菌生理鹽水的大試管或三角燒瓶中稀釋，制成孢子懸浮液，再用無菌的注射針筒或滴管，吸取孢子懸浮液，注入1~2滴孢子液于培養(yǎng)基表面，并用無菌接種環(huán)涂布培養(yǎng)，待孢子萌發(fā)后挑取孢子萌發(fā)早、長勢好的菌落進行轉(zhuǎn)管培養(yǎng)。
(2)菌褶貼管壁法：鉤取一塊干凈、發(fā)育良好的金針茹菌褶，在無菌操作條件下，貼在斜面培養(yǎng)基上方的試管內(nèi)壁上，為了讓之貼牢，可加1~2滴無菌水在試管壁上。放好菌褶后，塞入棉塞，置于適溫條件下培養(yǎng)。待看到培養(yǎng)基上產(chǎn)生與菌褶相應大小的霧狀物時，立即將附在試管壁上的菌褶片在無菌條件下取出。待長成肉眼可見的菌絲時，挑取并放入新的試管培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。
亮發(fā)光桿菌孢子分離污染率較高，要剔除肉眼可見的各種雜菌。之后，挑取的各菌株一定要經(jīng)過出茹試驗來鑒定是否是優(yōu)良的馴化菌株。
Phospho-Cofilin (Ser3) 環(huán)化核苷酸調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4
Phospho-Cofilin/CFL1 (Tyr139) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體
Phospho-Connexin 43 (Ser368) 還原型輔酶Ⅱ抗體
phospho-Cortactin (Tyr466) 踝蛋白抗體
phospho-CPI17 alpha (Thr38) 滑膜細胞凋亡抑制物1抗體
phospho-c-Raf (Ser259) 琥珀酸脫氫酶復合體亞基A抗體
phospho-c-Raf (Ser289) 呼吸道合胞病毒單克隆抗體
phospho-c-Raf (Ser296) 后期促進復合蛋白3抗體
phospho-c-Raf (Ser338) 紅細胞生成素受體抗體
亮發(fā)光桿菌
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