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黃曲霉PCR試劑盒的原理和質(zhì)量要求

閱讀：2053 發(fā)布時(shí)間：2020-3-5

　　黃曲霉PCR試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被黃曲霉毒素M1抗原，樣本中黃曲霉毒素M1和微孔條上抗原競(jìng)爭(zhēng)黃曲霉毒素M1抗體，同時(shí)黃曲霉毒素M1抗體與酶標(biāo)二抗相結(jié)合，經(jīng)TMB底物顯色，樣本吸光值與其含有的黃曲霉毒素M1成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中黃曲霉毒素M1的含量。

　　黃曲霉PCR試劑盒的原理：

　　基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)反應(yīng)原理，相關(guān)的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。***分析時(shí)，樣品加入微孔孵育，洗板后加入酶標(biāo)記物，若樣品殘留有黃曲霉M1就會(huì)競(jìng)爭(zhēng)包被抗體，抑制HRP酶標(biāo)與包被抗體結(jié)合，加入TMB后顯色反應(yīng)，顏色顯色強(qiáng)度與樣品中靶毒素的含量成反比。

　　黃曲霉PCR試劑盒的質(zhì)量要求：

　　1、真實(shí)性：重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析；必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。

　　2、純度：應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。

　　3、生物活性：進(jìn)行相應(yīng)的體外(invitro)或體內(nèi)(invivo)活性檢測(cè)。

　　4、蛋白含量：通過(guò)紫外光譜分析，SDS-PAGE電泳檢測(cè)；必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

　　5、內(nèi)毒素：kineticLAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。

　　6、微生物：重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除菌處理。

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