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上海申知心生物科技有限公司

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不開(kāi)胸制備兔縮窄性心包炎模型

2018-7-19 閱讀(2171)

不開(kāi)胸制備兔縮窄性心包炎模型

(1)復(fù)制方法  體重為1.5~2.0kg新西蘭兔,動(dòng)物行仰臥固定,用2%普魯卡因局部浸潤(rùn)麻醉。在其上腹部正中作一個(gè)小切口,取0.5g左右肝組織檢查肝臟含水量。然后,胸前正中切口約2cm,緊貼胸骨和左旁肋骨推開(kāi)胸前肌至胸骨旁1.5cm,將肋間肌切開(kāi)處上下肋骨向兩側(cè)拉開(kāi),避開(kāi)胸膜,顯露心包裸區(qū);用7號(hào)腰穿針于劍突下經(jīng)皮向心尖方向水平位穿刺,由心包膈面進(jìn)入心包腔。按1ml/kg體重注入誘導(dǎo)劑(誘導(dǎo)劑配制為:無(wú)菌滑石粉4g、四環(huán)素粉1g,加入1.5%碘酊20ml中,制成混懸液)。注入誘導(dǎo)劑后2周處死動(dòng)物,立即開(kāi)胸測(cè)左、右胸腔胸水,觀察心包增厚情況并評(píng)定心包增厚等級(jí)。取心肌、心包標(biāo)本各2塊做病理檢查。打開(kāi)腹腔測(cè)腹水,取肝組織標(biāo)本2塊,1塊送病理檢查,1塊檢查肝組織含水量。心包粘連與增厚程度評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):正常心包:心包菲薄、透明、心包與心肌無(wú)粘連,透過(guò)心包可清晰見(jiàn)到心肌表面血管網(wǎng);心包增厚變白,心包與心肌有散在絲狀粘連,透過(guò)心包可見(jiàn)到心肌表面較大的血管;心包增厚變白,心包與心肌粘連,透過(guò)心包看不到血管,但可見(jiàn)到心肌;心包增厚變白,不能透過(guò)心包看到心肌。肝含水量測(cè)定與計(jì)算:模型制作前和制作后2周,分別取0.5g大小肝組織1塊,生理鹽水漂洗后,濾紙吸干水分,分析天平上稱(chēng)重為濕重,置60℃烤箱72h,達(dá)恒重時(shí)之重量為干重。然后按下式計(jì)算:肝含水量=(肝濕重-干重)/濕重×比率,取心包、心肌、肝組織標(biāo)本用10%甲醛溶液固定,石蠟包埋后切片,HE染色,光鏡下觀察。

(2)模型特點(diǎn)  該模型制作采用局麻下不經(jīng)胸注入誘導(dǎo)劑的方法,簡(jiǎn)單易行,對(duì)動(dòng)物機(jī)體干擾小,術(shù)后不需特別護(hù)理。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心包增厚的判斷亦作了些改進(jìn)。傳統(tǒng)的方法是將心包標(biāo)本做病理切片后在顯微鏡下觀察比較,由于標(biāo)本取材和觀察者的認(rèn)識(shí)不同,使心包增厚的判斷缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)利用兔正常心包的透明特性,把心肌及其表面血管作為參照物來(lái)評(píng)價(jià)心包的增厚情況,對(duì)心包的增厚進(jìn)行了相對(duì)量化的處理,對(duì)心包厚度的判斷確立了相對(duì)明確的客觀指標(biāo)。且本模型所采取的動(dòng)物來(lái)源多、價(jià)格低的兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,操作簡(jiǎn)便、快速、有利于模型的大量復(fù)制。為進(jìn)一步深入研究縮窄性心包炎提供了一種新的動(dòng)物模型。

(3)比較醫(yī)學(xué)  臨床心包縮窄后,限制了心肌的舒張與收縮,靜脈回流受阻,體靜脈淤血,動(dòng)脈供血不足,重要臟器缺血缺氧。本模型顯示,在心包腔內(nèi)注入誘導(dǎo)劑后2周,動(dòng)物出現(xiàn)了心包增厚,呼吸加快,胸水、腹水、肝含水量增加等肺循環(huán)和體循環(huán)淤血體征。這些表現(xiàn)與縮窄性心包炎的臨床體征相類(lèi)似。動(dòng)物解剖亦顯示兔不同于犬、羊等動(dòng)物,胸腔胸膜反折與人類(lèi)十分相似,在心包前存在約1cm2大小胸膜裸區(qū)。



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