Minimal SD Base 酵母
描述:
SD(synthetically defined)系列培養(yǎng)基屬于Minimal medium,也可以稱為不*培養(yǎng)基。Minimal SD Base由硫酸銨、微量元素、葡萄糖按比例混合而成,可以提供野生型酵母菌維持生存所需的基本物質(zhì),但不包含突變菌株的氨基酸。Minimal SD Agar Base在前者基礎(chǔ)上加入Agar。Minimal SD Base Gal/Raf由硫酸銨、微量元素、半乳糖及棉子糖混合而成;Minimal SD Base Gal由硫酸銨、微量元素、半乳糖混合而成;Minimal SD Base Raf 由硫酸銨、微量元素、棉子糖混合而成,對應的固體培養(yǎng)基均在其基礎(chǔ)上加入Agar。
Minimal Liquid Media with Glucose (Broth)
1. 在1 L去離子水中加入相應量的Minimal SD Base和Dropout Supplements(缺陷型氨基酸混合物),攪拌溶解。
2. 調(diào)節(jié)pH 至5.8。121℃高壓15分鐘。
3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)的液體培養(yǎng)基。
酵母單雜交(Yeast one-hybrid)是根據(jù)DNA結(jié)合蛋白(即轉(zhuǎn)錄因子)與DNA順式作用元件結(jié)合調(diào)控報告基因表達的原理,克隆與靶元件結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子基因(cDNA)的方法。其理論基礎(chǔ)是:許多真核生物的轉(zhuǎn)錄子由物理和功能上的DNA結(jié)合區(qū)(DNA-binding domain BD)和轉(zhuǎn)錄區(qū)(Activation domain AD)組成,因此可構(gòu)建基因與AD的融合表達載體,在酵母中表達為融合蛋白時,根據(jù)報道基因的表達情況,便能篩選出與靶元件有結(jié)合區(qū)域的蛋白。理論上,在單雜交檢測中,靶元件都可被用于篩選一種與之有結(jié)合區(qū)域的蛋白。
雙雜交系統(tǒng)的建立得力于對真核生物調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始過程的認識。細胞起始基因轉(zhuǎn)錄需要有反式轉(zhuǎn)錄因子的參與。80年代的工作表明, 轉(zhuǎn)錄因子在結(jié)構(gòu)上是組件式的(modular), 即這些因子往往由兩個或兩個以上相互的結(jié)構(gòu)域構(gòu)成,其中有DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DNA binding domain,簡稱為BD)和轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)域(activation domain,簡稱為AD),它們是轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮功能所的。單獨的BD雖然能和啟動子結(jié)合,但是不能轉(zhuǎn)錄。而不同轉(zhuǎn)錄因子的BD和AD形成的雜合蛋白仍然具有正常的轉(zhuǎn)錄的功能。如酵母細胞的Gal4蛋白的BD與大腸桿菌的一個酸性結(jié)構(gòu)域B42融合得到的雜合蛋白仍然可結(jié)合到Gal4結(jié)合位點并轉(zhuǎn)錄。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
SD with Amino acids Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade/-His Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp/-Ura Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp Broth | 10×0.5L |
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura Broth | 10×0.5L |
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yyp2021.2.3
Minimal SD Base 酵母