如何使用牛津杯做抑菌試驗(yàn)/藥敏實(shí)驗(yàn)(杯碟法)
抑菌試驗(yàn)/藥敏實(shí)驗(yàn)方法主要有兩種,即擴(kuò)散法和稀釋法。其中擴(kuò)散法屬手工測(cè)試方法,通過(guò)測(cè)試藥物紙片 或者牛津杯在固體培養(yǎng)基上的抑菌圈的大小,判斷細(xì)菌對(duì)該種藥物是否敏感。 稀釋法包括試管稀釋法和微量稀釋法,通過(guò)測(cè)試細(xì)菌在含不同濃度藥物培養(yǎng)基內(nèi)的生長(zhǎng)情況,判斷其zui低抑菌 濃度(MIC)。 由于擴(kuò)散法操作簡(jiǎn)單,成本低,已經(jīng)被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室和基層單位所采用。擴(kuò)散法又包括紙片法、牛津杯法 和打孔法。
牛津杯法實(shí)驗(yàn)原理 :1、將培養(yǎng)基平板置培養(yǎng)箱中培養(yǎng),一方面試驗(yàn)菌(指示菌)開始生長(zhǎng)繁殖;另一方面抗生素呈球面擴(kuò)散,形 成遞減的梯度濃度,離杯越近,抗生素濃度越大,離杯越遠(yuǎn)抗生素濃度越小。 2、在牛津杯周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌的生長(zhǎng)被抑制,形成透明的抑菌圈。 3、抑菌圈的大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度(藥敏實(shí)驗(yàn))或藥物對(duì)指示細(xì)菌的抑菌程度(抑菌試驗(yàn))。 4、抗生素濃度越高,抑菌圈越大。 5、在抑菌圈的邊緣處,瓊脂培養(yǎng)基中所含抑菌物質(zhì)的濃度即為該菌懸液中對(duì)該種指示菌的zui低抑菌濃度 (MIC) 。 6、抑菌圈直徑與藥物對(duì)測(cè)試菌的zui低抑菌濃度 呈負(fù)相關(guān),即抑菌圈愈大,MIC 愈小