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斑馬魚孕酮(PROG)ELISA試劑盒操作步驟:
①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
②.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
④.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次 (也可用洗板機洗板)。
⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
⑦.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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