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產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-13 08:30:31瀏覽次數(shù):301次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)小鼠T淋巴細(xì)胞;CTLL-2價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠T淋巴細(xì)胞;CTLL-2價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 具有細(xì)胞毒作用的T-細(xì)胞株。 IL-2依賴型。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%;100U/ml rmIL-2
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
TPPU (25 mg)N-[1-(1-oxopropyl)-4-piperidinyl]-N’-[4-(trifluoromethoxy)phenyl)-urea
(±)-Ethylphenidate (hydrochloride) (10 mg)α-phenyl-2-piperidineacetic acid, ethyl ester, monohydrochloride; Ritalinic Acid ethyl ester; (±)-Ethylphenidate (hydrochloride)
(±)20-HDoHE (250 ug)(±)20-hydroxy-4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,18E-docosahexaenoic acid; 20-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)20-HDoHE
(±)8,9-DHET (250 ug)(±)8,9-dihydroxy-5Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; (±)8,9-DiHETrE; (±)8,9-DHET
Everolimus (25 mg)Afinitor|Certican|NVP-RAD001|RAD001; 42-O-(2-hydroxyethyl)-rapamycin
WIKI4 (10 mg)Tankyrase 1/2 Inhibitor V; 2
30C-NBOMe (hydrochloride) (1 mg)2-(4-chloro-2,5-dimethoxyphenyl)-N-(3,4,5-trimethoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
TBCA (25 mg)Casein Kinase II Inhibitor III|Tetrabromocinnamic Acid; (2E)-3-(2,3,4,5-tetrabromophenyl)-2-propenoic acid
Roflumilast (5 mg)B 9302-107|BY 217|BYK 20869|Daxas; 3-(cyclopropylmethoxy)-N-(3,5-dichloro-4-pyridinyl)-4-(difluoromethoxy)-benzamide
FG-4592 (25 mg)ASP1517|Roxadustat; N-[(4-hydroxy-1-methyl-7-phenoxy-3-isoquinolinyl)carbonyl]-glycine
YZ9 (50 mg)7-hydroxycoumarin-3-Carboxylic Acid ethyl ester; 7-hydroxy-2-ozo-2H-1-benzopyran-3-carboxylic acid, ethyl ester
Stauprimide (500 ug)N-Benzoyl-7-oxo Staurosporine; N-[(9S,10R,11R,13R)-2,3,10,11,12,13-hexahydro-10-methoxy-9-methyl-1,3-dioxo-9,13-epoxy-1H,9H-diindolo[1,2,3-gh:3’,2’,1’-lm]pyrrolo[3,4-j][1,7]benzodiazonin-11-yl]-N-methyl-benzamide
Metoprolol (succinate) (50 mg)1-[4-(2-methoxyethyl)phenoxy]-3-[(1-methylethyl)amino]-2-propanol, butanedioic acid
ATM4 4-acetoxy analog (5 mg)N-[2-[5-(acetyloxy)-3,6-dimethoxy-1-phenanthrenyl]ethyl]-N-methyl-acetamide
Mdivi 1 (5 mg)Mitochondrial Division Inhibitor 1; 3-(2,4-dichloro-5-methoxyphenyl)-2,3-dihydro-2-thioxo-4(1H)-quinazolinone
Eplerenone (5 mg)Epoxymexrenone|Inspra; (7α,11α,17α)-9,11-epoxy-17-hydroxy-3-oxo-pregn-4-ene-7,21-dicarboxylic acid, γ-lactone, 7-methyl esterSG1117 菌種1mL
DH10B 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10
DNA 快速連接試劑盒100 次
GAL 指示劑培養(yǎng)基100mL
CAS596-09-8二熒光素1g
140653-1親和層析柱50 mL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
2.0 mL RNase-free 離心管500 支
Cycloheximide50mg
Southern Marker Oligo(DIG)20 次
130301-150天凈沙 DNA 甲基化修飾試劑盒150 次
120674-50酪蛋白50g
*0 菌種1mL
分子生物學(xué)糖原干粉1.0g
n- 基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷1g
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
CAS53597-25-4魚精蛋白硫1g
131192-25超敏化學(xué)發(fā)光 (AP) 檢測試劑盒(ECL)25mL
100803-100酸酚100mL
Origami B 菌種1mL
Caspase 9 檢測試劑盒 50 次
柱式酵母質(zhì)粒 DNAout50 次
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