小鼠單核巨噬細(xì)胞；J774A.1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠單核巨噬細(xì)胞；J774A.1圖片
形態(tài)特性  單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞來(lái)源于BABL/cN小鼠，有抗體依賴的吞噬作用，生長(zhǎng)受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制；可產(chǎn)生IL-1β和大量的溶菌酶。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

PB-22 5-hydroxyquinoline isomer （10 mg）quinolin-5-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate； PB-22 5-hydroxyquinoline isomer
PB-22 6-hydroxyisoquinoline isomer （5 mg）isoquinolin-6-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate； PB-22 6-hydroxyisoquinoline isomer
7-dehydro Cholesterol （50 g）cholesta-5，7-dien-3β-ol； 7-DHC|NSC 18159|Provitamin D3|Δ7-Cholesterol； 7-dehydro Cholesterol
Zaltoprofen （500 mg）10，11-dihydro-a-methyl-10-oxo-dibenzo[b，f]thiepin-2-acetic acid； CN 100|Soleton； Zaltoprofen
25E-NBOMe （hydrochloride） （5 mg）2-（4-ethyl-2，5-dimethoxyphenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethan-1-amine， monohydrochloride； 2C-E-NBOMe； 25E-NBOMe （hydrochloride）
SU 9516 （1 mg）1，3-dihydro-3Z-（1H-imidazol-5-ylmethylene）-5-methoxy-2H-indol-2-one； SU 9516
Leflunomide （50 mg）5-methyl-N-[4-（trifluoromethyl）phenyl]-4-isoxazolecarboxamide； Arava|Avara|HW 486|SU 101； Leflunomide
Nitracaine （10 mg）3-（diethylamino）-2，2-dimethylpropyl 4-nitrobenzoate； Nitracaine
CTAP （1 mg）D-phenylalanyl-L-cysteinyl-L-tyrosyl-D-tryptophyl-L-arginyl-L-threonyl-3-mercapto-L-valyl-cyclic （2→7）-disulfide-L-threoninamide； CTAP
PF-04981517 （25 mg）1-methyl-3-[1-methyl-5-（4-methylphenyl）-1H-pyrazol-4-yl]-4-[（3S）-3-（1-piperidinyl）-1-pyrrolidinyl]-1H-pyrazolo[3，4-d]pyrimidine； CYP3cide； PF-04981517一管式病毒 DNA-RNAout50 次
考馬斯亮藍(lán) R-25010g
辣根過(guò)氧化物酶10mg
D/F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
柱式軟體 RNAout50 次
120308-15植物葉綠體純化試劑盒15 次
70503A-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (50-500 bp)50 次
腎系膜細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA 酶，Ⅱ型80U
大提柱式動(dòng)物 RNAout5次
Protein A 瓊脂糖1mL
130648-200Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶200U
130995-25Cy3-dCTP 溶液，10mM25μL
TBE 電泳液 ,10×250mL
碘5g
親和硅烷 25mL
海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒100 次
131087-100堿性磷酸酶標(biāo)記親和素100mg
90702-20即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次
脫氧膽酸10g