細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

名稱    RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7

種屬 小鼠

年齡（性別） 雄性，成年

組織來(lái)源 Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細(xì)胞；巨噬細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞，不用消化

細(xì)胞形態(tài) 不規(guī)則形

背景描述 RAW 264.7細(xì)胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW 264.7細(xì)胞不分泌可檢測(cè)到的病毒顆粒，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。RAW 264.7細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖，并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)RAW 264.7細(xì)胞分解紅血球，但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無(wú)作用。

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:6~1:8

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~12-30小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

受體表達(dá)情況 complement (C3)

抗原表達(dá)情況 H-2d

基因表達(dá)情況 lysozyme, H-2d; Tested and found negative for ectromelia virus (mousepox).

注意事項(xiàng) 1、該細(xì)胞不建議使用消化，會(huì)刺激分化； 2、 超過(guò)3天不傳代細(xì)胞容易分化； 3、 培養(yǎng)時(shí)，存在少量分化細(xì)胞，屬于正?，F(xiàn)象。

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; TIB-71 ECACC; 91062702

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

痤瘡桿菌   金黃色葡萄球菌金黃色亞種  抗生素測(cè)定菌株

膠紅酵母   金黃色葡萄球菌ATCC43300凍干粉

Hyphomonasadhaerens   紅串紅球菌

嗜熱乳酸鏈球菌AS1.1864凍干粉   皂味口磨

白球擬酵母   珊瑚色諾卡氏菌
胞漿蛋白提取試劑盒100T

胞漿蛋白提取試劑盒50T

細(xì)胞蛋白提取試劑盒100T

細(xì)胞蛋白提取試劑盒50T

組織蛋白提取試劑盒100T
RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（GLUT4）elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠前白蛋白(PA)elisa檢測(cè)試劑盒
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