您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 20:26:38瀏覽次數(shù):324次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMP |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白 | Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMPD3) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
NSMASE2; Neutral Sphingomyelinase II 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預(yù)測分子量:29.9kDa 實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Asp417~Gly651 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:4.8 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)Homo sapiens (Human,人)
周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)Homo sapiens (Human,人)
周期素依賴性激酶6(CDK6)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6)Homo sapiens (Human,人)
周期素依賴性激酶7(CDK7)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 7 (CDK7)Homo sapiens (Human,人)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Annexin V產(chǎn)品名稱: 膜粘連蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, GuineaPig
Menin產(chǎn)品名稱: Menin抑蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
RhoF產(chǎn)品名稱: RhoF蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
PAG608產(chǎn)品名稱: 野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse
PDGF-D/SCDGFB產(chǎn)品名稱: 小板源性生長因子D/脊髓源性生長因子B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PDILT產(chǎn)品名稱: 蛋白二硫鍵異構(gòu)meiA7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
RPE65產(chǎn)品名稱: 視網(wǎng)膜色su上皮細胞特異性蛋白65抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Sumo 3產(chǎn)品名稱: 泛su樣蛋白Sumo3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
BAG5產(chǎn)品名稱: BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog
STAT4產(chǎn)品名稱: 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白人L-蘇氨suan脫氫mei(TDH)ELISA試劑盒TDHL-蘇氨suan脫氫meielisa kitHuman L-Threonine Dehydrogenase(TDH)ELISA Kit
人Ly6/神經(jīng)毒su1(LYNX1)ELISA試劑盒LYNX1Ly6/神經(jīng)毒su1ELISA試劑盒Human Ly6/Neurotoxin 1(LYNX1)ELISA Kit
人Lunapark蛋白(LNP)ELISA試劑盒LNPLunapark蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Lunapark(LNP)ELISA Kit
人LIM半胱氨suan豐富域蛋白1(LMCD1)ELISA試劑盒LMCD1LIM半胱氨suan豐富域蛋白1elisa檢測試劑盒Human LIM And Cysteine Rich Domains Protein 1(LMCD1)ELISA Kit
人Limkainβ1蛋白(LKAP)ELISA試劑盒LKAPLimkainβ1蛋白elisa kitHuman Limkain b1(LKAP)ELISA Kit
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。