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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-21 19:35:24瀏覽次數(shù):299次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:布魯氏桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Brucella spp.PCR布魯氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒Brucella spp.布魯氏菌PCR試劑盒布魯氏菌核suan熒光PCR檢測(cè)試劑盒(探針法)布魯氏桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Brucella spp.PCR水牛正痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒Buffalo Pox Virus(BPXV)PC

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1)

MAP3-K5; MAP3K5; ASK1; MAPKKK5; MEKK5; Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase Kinase 5; MAPK/ERK kinase kinase 5

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:32.2kDa

實(shí)際分子量:32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly681~Glu936 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):6.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human MLL5宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human MICAL1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SPARCL1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human PRDX4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

圖片6.png


標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

應(yīng)用類型: Phosphorylated英文名稱: Histone H3 (Nuclear Loading Control)英文別名: H3 histone X3D/RNF193產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白193抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

SMAD9產(chǎn)品名稱: SMAD家族9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

BTG2產(chǎn)品名稱: B細(xì)胞遷移基因2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, GuineaPig

A Raf產(chǎn)品名稱: A-Raf抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-Tau (Thr548)產(chǎn)品名稱: 微管相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

AFP產(chǎn)品名稱: 甲胎蛋白AFP抗體交叉反應(yīng): Human

INPP5A產(chǎn)品名稱: 聚磷suan肌醇磷suanmei5A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

phospho-c-Jun (Ser63)產(chǎn)品名稱: 原基因c-Jun抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

C9orf3產(chǎn)品名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken
凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白人抗α-胞襯蛋白抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG抗α-胞襯蛋白抗體ELISA試劑盒Human anti-alpha-Fodrin antibody IgG ELISA Kit

人抗UACA抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG抗UACA抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-UACA antibody IgG ELISA Kit

人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNRNP70)抗體ELISA試劑盒SNRNP70抗U1小核核糖核蛋白70kDaelisa檢測(cè)試劑盒Human anti U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNRNP70)antibody ELISA kit

人抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒sp100抗sp100抗體elisa kitHuman anti-sp100-antibody ELISA Kit

人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒Sc1-70-Ab抗Sc1-70抗體ELISA試劑盒Human Sc1-70 Antibody,Sc1-70-Ab ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

 


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