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更新時間:2023-03-22 22:06:54瀏覽次數(shù):320次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Eukaryotic Carbonic Anhydrase IX (CA9) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產品僅供科研使用,不得用于臨床!
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)真核蛋白 | Eukaryotic Carbonic Anhydrase IX (CA9) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
CA-IX; CAIX; MN; pMW1; P54/58N; Carbonic Dehydratase; Renal cell carcinoma-associated antigen G250; RCC-Associated Protein G250; Carbonate dehydratase IX 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:真核表達 宿主293F cell 內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::細胞膜, 細胞核 預測分子量:40.4kDa 實際分子量:44kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Pro59~Asp414 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:4.2 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)重組蛋白Recombinant DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)
磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)重組蛋白Recombinant DNA Methyltransferase 3B (DNMT3B)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Glucocorticoid Receptor產品名稱: 糖皮質激su受體(β)抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
FBXO25產品名稱: F-box蛋白家族FBXO25抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit
APOC2產品名稱: 載脂蛋白C2抗體交叉反應: Mouse, Rat
CEP89產品名稱: 中心體蛋白89抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
CD21產品名稱: 2型補體受體抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog
SLPI產品名稱: 分泌型白細胞蛋白mei因子抗體交叉反應: Human
GGCX產品名稱: γ-谷氨酰羧化mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
NFXL1產品名稱: 核轉錄因子NFXL1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Rabbit, Bee, GuineaPig, Chimpanzee
Seryl-tRNA synthetase產品名稱: 絲氨suantRNA連接mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
GNRH/LHRH產品名稱: 黃體激su釋放激su類似物抗體交叉反應: Human
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)真核蛋白大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)ELISA試劑盒Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581纖維蛋白原β鏈elisa檢測試劑盒Rat fibrinogen beta chain ELISA Kit
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大鼠細胞色suP450 3A4(CYP3A4)ELISA試劑盒CYP3A4細胞色suP450 3A4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Cytochrome P450 3A4,CYP3A4 ELISA Kit
大鼠細胞色suP450 1A1(CYP1A1)ELISA試劑盒CYP1A1細胞色suP450 1A1elisa檢測試劑盒Rat Cytochrome P450 1A1,CYP1A1 ELISA Kit
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