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資源名稱 rBinlb10A5*
種屬  7

形態(tài)  淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

生長(zhǎng)特性  半貼壁生長(zhǎng)

詳細(xì)說(shuō)明

描述  該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。

傳代情況  C5

支原體檢測(cè)  陰性

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
rBinlb10A5*操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
rBinlb10A5*注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。131231-25    Oligo(dT) 纖維素    25mg
130204-1    Oligo 快速?gòu)?fù)性液，10×    1mL
100814-5    Oligo dT12-18 引物，0.5μg/μL    5μg
23-0560-10    Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )    10μg
CAS2645-08-1    Nα- 苯甲酰精氨酸乙酯    10g
23-0550-1    Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 )    1mg
70906-0.5    NTP 溶液，10mM    0.5mL
23-0540-1    NS-398(COX-2 抑制劑 )    1mg
23-0530-1    NS-2028(sGC 抑制劑 )    1mg
131009-100    NP-40 裂解液    100mL
12-244    Novablue(DE3) 菌種    1mL
17-0160    NotI    150U
R003-1    Northern 雜交技術(shù)服務(wù)    1 張膜
23-0520-5    Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )    5mg
12-196    NMY51 酵母菌種    1mL
140388-10    NMY51 酵母感受態(tài)細(xì)胞    10×100μL
22-0530-25    Nile Red    25mg
23-0510-10    Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )    10g
18-0110-50    NF-κB 激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒    50 次
17-0150    NdeI    400U
17-0130    NcoI    200U
22-0520-25    NBD-Cl    25mg
22-0510-25    NAO     25mg