公司動態(tài)
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轉(zhuǎn)化細胞冷凍前需注意的事項
1、材料:轉(zhuǎn)化細胞生長良好之培養(yǎng)細胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO(SigmaD-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene5000-0020)、0.4%(w/v)trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球計數(shù)盤與蓋玻片、等速降溫機(KRYO10SeriesII)。2、冷凍保存方法:(1)傳統(tǒng)方法:冷【詳細】
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影響人正常組織來源細胞的代謝和功能
支原體可使培液中支持人正常組織來源細胞生長的營養(yǎng)物質(zhì)含量減少,造成細胞生長緩慢甚至停止;細胞狀態(tài)變差,生長變慢,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。會導致細胞微管解聚,引起細胞一系列病變,表現(xiàn)為細胞收縮、貼壁細胞脫落、裂解【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞分裂增殖與生長發(fā)育的能力
轉(zhuǎn)化細胞傳代期--細胞系:將原代培養(yǎng)物經(jīng)過分割,重新接種到兩個或兩個以上的器皿內(nèi)進行培養(yǎng),進入傳代培養(yǎng)期,是整個培養(yǎng)過程的主要時期。原代培養(yǎng)物要經(jīng)過反復傳代,傳代培養(yǎng)期要經(jīng)過反復傳代。傳代培養(yǎng)期并不單指培養(yǎng)物經(jīng)傳代后的*代培養(yǎng)過程,而是指由傳【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞保持存活的原理
這種微針能夠被如此準確地控制以至于科學家們能夠要么收集轉(zhuǎn)化細胞的內(nèi)含物,要么收集細胞核周圍的胞內(nèi)液,即細胞質(zhì)。zui后同樣重要的是,研究人員能夠非常準確地確定他們提取的胞內(nèi)物質(zhì)的容量,zui低到一萬億分之一升(pictolitre)。相比較而言,一個細胞的【詳細】
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人正常組織來源細胞瞬時轉(zhuǎn)染流程
原理:人正常組織來源細胞通過脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將靶基因?qū)爰毎话阍谵D(zhuǎn)染后48小時左右,靶基因即可在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗目的,48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。應用:觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功【詳細】
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測定轉(zhuǎn)化細胞周期方法的操作步驟
轉(zhuǎn)化細胞周期指細胞一個世代所經(jīng)歷的時間。從一次細胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多,有同【詳細】
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人正常組織來源細胞的運用與意義
人正常組織來源細胞是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為人正常組織來源細胞培養(yǎng)。人正常組織來源細胞是這樣的一個來源。那么原代細胞具體的運用和意義在哪里呢?下面我們就一起來討論下人正常組織來源細胞的意義【詳細】
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什么是干細胞
簡而言之,干細胞就是一類會“變”的細胞。首先,它有自我更新能力,可以在動物胚胎和組織中一直分裂并保持原本的未分化狀態(tài)。其次,它具有分化的能力,也就是“變”的能力,在不同的培養(yǎng)條件下,它可以變成不同種類、具有不同功能的細胞。再次,它是一類在細【詳細】
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影響人正常組織來源細胞轉(zhuǎn)染效率因素有哪些?
影響人正常組織來源細胞轉(zhuǎn)染效率因素主要有三個,細胞種類(狀態(tài))、質(zhì)粒以及轉(zhuǎn)染試劑。為了得到一個好的轉(zhuǎn)染結(jié)果,我們要像下面這樣做。轉(zhuǎn)染前1、轉(zhuǎn)染前細胞的狀態(tài)和密度都非常影響轉(zhuǎn)染效率和后期的實驗結(jié)果。轉(zhuǎn)染時細胞的密度為50%-80%較好,同時注意在轉(zhuǎn)染【詳細】
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干細胞發(fā)育*的蛋白
干細胞在實驗室中制備更接近于自然環(huán)境中發(fā)育的造血干細胞,奠定了基礎。這項研究使我們能夠制備患者特異性的造血干細胞用于移植,可能會為血液相關(guān)疾病和癌癥帶來改進的療法。研究人員一直都想將細胞療法更加廣泛地用于血液和免疫疾病,但是受到了挫折,因為【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞制標本的過程是怎樣的呢?
轉(zhuǎn)化細胞實驗中所需要用到的試劑以及器材1、各種特異性單克隆抗體。2、熒光標記的羊抗鼠或兔抗鼠第二抗體,滅活正常兔血清。3、10%FCSRPMI1640,DPBS、洗滌液、固定液。4、玻璃管、塑料管、離心機、熒光顯微鏡等。在進入實驗步驟之前,上海恒遠要先為朋友們說【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞的代謝過程
轉(zhuǎn)化細胞分別描述基因的分子功能、參與的生物過程和所處的細胞位置。分子功能分析結(jié)果顯示:與PRRSVnsp11互作的宿主細胞蛋白具有結(jié)合能力和酶活性;生物過程分析結(jié)果顯示:與nsp11互作的宿主細胞蛋白主要參與細胞的代謝過程,蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾、翻譯【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞研究的意義是什么
轉(zhuǎn)化細胞研究人員指出,這些研究結(jié)果也適用于核糖體某一組件發(fā)生遺傳突變的小鼠模型,他們發(fā)現(xiàn)干細胞的蛋白質(zhì)生成率減少了30%。此外,科學家們還通過在造血干細胞中刪除腫瘤抑制基因Pten提高了蛋白質(zhì)合成率。在這兩種情況下,干細胞功能均顯著受損。這些觀察【詳細】
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如何選擇干細胞培養(yǎng)板?
干細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗目的而定。(一)平底和圓底(U型和V型【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞活化過程中信號轉(zhuǎn)導的分子基礎
轉(zhuǎn)化細胞是免疫系統(tǒng)中重要的免疫活性細胞,其活化過程的信號轉(zhuǎn)導(signaltransduction)及其分子基礎極為復雜,是目前分子免疫學及免疫生物學中研究的熱點。目前對T淋巴細胞活化過程中信號轉(zhuǎn)導及其分子基礎的研究較深入,而對B細胞的研究資料還較缺乏。本章著【詳細】
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干細胞的“全家?!?/a>
干細胞可是一個大家族,根據(jù)不同的分法可以分為以下幾類:首先,根據(jù)它的發(fā)育等級和分化能力,可以分為干細胞、多能干細胞和單能干細胞。干細胞,顧名思義就是啥樣的細胞都能變,嘻嘻,實際上不是的,光“啥都能變”有啥了不起的?干細胞的能耐可不止這么點!【詳細】
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人類對人正常組織來源細胞命運調(diào)控的認識
人正常組織來源細胞處于某一特定狀態(tài)時,它會選擇性閱讀與該細胞相關(guān)的所有信息,同時要屏蔽其它不需要的信息。將體細胞誘導為多能干細胞(俗稱的“細胞水平返老還童”)是探索這種機理的理想體系。成纖維細胞在導入誘導因子后,會啟動一套奇妙的未知程序,將【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞劃痕實驗步驟
轉(zhuǎn)化細胞材料:6孔板marker筆直尺20微升槍頭(滅菌)無血清培養(yǎng)基PBS準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至【詳細】
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轉(zhuǎn)化細胞遷移實驗注意事項
轉(zhuǎn)化細胞遷移實驗的注意事項(1)根據(jù)待測細胞體積大小選擇合適孔徑的ThinCert。常用的為8.0-μm孔徑(如AGS細胞),如果細胞體積較大可以考慮用10-μm孔徑;(2)根據(jù)待測細胞遷移能力強弱調(diào)整細胞數(shù)和遷移時間。常規(guī)24-wellThinCert接種細胞數(shù)約為2≈5×104/【詳細】
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影響腫瘤細胞復蘇的因素
(a)腫瘤細胞類型,(b)生長階段,(c)細胞處于細胞周期的哪個階段,(d)終懸液中的細胞數(shù)量和濃度??赏ㄟ^優(yōu)化以上因素來提高復蘇細胞活力,另外,還需考慮凍存保護劑的特性以及凍存過程的具體操作。哺乳動物細胞培養(yǎng)對其他細胞和微生物的污染特別敏感,【詳細】
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