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細胞破碎的3種主要方法
閱讀：17057 發(fā)布時間：2019-5-22
一、機械法
1.勻漿器：先將剪碎的組織置于管中，再套入研桿來回研磨，上下移動，即可將細胞研碎。此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高，適用于量少和動物臟器組織。較易造成堵塞的團狀或絲狀真菌，較小的革蘭氏陽性首以及有些亞細胞器，質地堅硬，易損傷勻漿閥，也不適合用該法處理。
2.組織搗碎：一般用于動物組織、植物肉質種子、柔嫩的葉芽等。由于旋轉刀片的機械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用。
3.研缽：多用于細菌或其他堅硬植物材料，研磨時常加入少量石英砂，玻璃粉或其他研磨劑，以提高研磨效果。
二、化學及生物化學法
1.自溶法：在一定PH和適當的溫度下，利用組織細胞內自身的酶系統(tǒng)將細胞破碎的方法。此過程需較長時間，常用少量防腐劑如甲苯等防止細胞的污染。
2.化學滲透法：某些有機溶劑（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內合物有選擇地滲透出來。
3.酶溶法：利用各種水解酶，如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶、半纖維素酶、脂酶等，將細胞壁分解，使細胞內含物釋放出來。
三、物理法
1.反復凍溶法：將待破碎的細胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復幾次，由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細胞結構破碎。
2.急熱驟冷法：將材料投入沸水中，維持85-90分鐘，至水浴中急速冷卻，此法可用于細菌及病毒材料。