Phalloidin是蘑菇鵝膏菌中的一種七個(gè)氨基酸的肽毒素，它與肌動(dòng)蛋白（F-actin）的聚合形式特異性結(jié)合并具有高親和力（kd20nm）。Phalloidin將肌動(dòng)蛋白聚合的臨界濃度降低到1µg/ml以下，從而起到聚合促進(jìn)劑的作用。Phalloidin已經(jīng)用一種專有的紅色熒光染料標(biāo)記，它可以用來(lái)染色組織培養(yǎng)細(xì)胞和組織切片中的肌動(dòng)蛋白絲（1，見圖1）?以及無(wú)細(xì)胞制劑?；钚匀旧?trade; 555yin莖環(huán)素標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲保留了未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白的許多功能特性，包括它們與肌球蛋白相互作用的能力。肌動(dòng)蛋白染色™ 555 phalloidin以紅色固體形式提供。

3T3細(xì)胞Rho活化，細(xì)胞核用Dapi（藍(lán)色）染色，F-肌動(dòng)蛋白用Acti染色™ 555（紅色F-肌動(dòng)蛋白，Cat.#PHDH1-A）。

Acti染色的吸光度和熒光掃描™ 將標(biāo)記的鬼筆苷稀釋到甲醇中，分別在300-750和560-750nm之間掃描其吸光度和激發(fā)光譜。吸收峰在560nm處，熒光峰在575nm處。

Acti-stain 555鬼筆環(huán)肽用途：

1.固定組織切片和組織培養(yǎng)細(xì)胞制備中肌動(dòng)蛋白絲的熒光染色。注：與許多肌動(dòng)蛋白抗體不同，Acti染色™ 555 phalloidin僅與F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合，導(dǎo)致低背景熒光。此外，肌動(dòng)蛋白染色并沒(méi)有明顯的不同物種。

2.穩(wěn)定熒光肌動(dòng)蛋白絲的體外制備。

肌動(dòng)蛋白染色對(duì)確定活細(xì)胞和固定細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)和功能非常有用。肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架在活細(xì)胞中是一個(gè)非常動(dòng)態(tài)和不穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，但它可以在探測(cè)或染色肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)之前用多聚甲醛固定。