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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>非常好的活體染料——細胞膜熒光探針尼羅紅
目前脂類染色使用zui廣泛的染料是蘇丹染料,zui常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等,這種脂肪染色方法,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色的過程,經(jīng)研究認(rèn)為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時,對蘇丹染料著色效果很好,根據(jù)這一原理,適當(dāng)提高溫度(37℃-60℃)會對組織切片產(chǎn)生較好的染色效果。
蘇丹染料主要針對于組織切片的脂質(zhì)染色,同時靈敏度也較低,且存在操作過程中試劑揮發(fā)過多,易形成背景沉淀,無法兼容活細胞等局限。
鑒于脂質(zhì)化學(xué)染料有上述諸多弊端,今天給大家介紹一下尼羅紅這種比較實用的脂質(zhì)熒光染料。
尼羅紅(也被稱為尼羅藍惡嗪酮)是一種親脂性染料,它對環(huán)境非常敏感。尼羅紅在脂質(zhì)豐富的環(huán)境中具有強烈的熒光,在以水為介質(zhì)的環(huán)境中,其熒光強度非常弱。它是非常好的活體染料,通過熒光顯微鏡和流式細胞術(shù)來檢測細胞內(nèi)脂質(zhì)。尼羅紅將細胞內(nèi)脂質(zhì)體染成紅色。它對細胞質(zhì)中的脂質(zhì)體具有更好的選擇性,在細胞中看見的是金黃色熒光(450-500 nm 激發(fā); >528 nm發(fā)射)而不是紅色熒光(515-560 nm激發(fā); >590 nm 發(fā)射)。這是一種很強的熒光,但是只有在疏水性環(huán)境中。
艾美捷 尼羅紅(cat#22190)染色結(jié)果賞析:
尼羅紅染色IAA處理的褐藻(黃色是葉綠體,紅色是脂滴)
引文:Indole-3-acetic-acid-induced phenotypic plasticity in Desmodesmus algae by Chung et al., Scientific Reports, July 2018.
除了廣泛使用的尼羅紅,升級版脂質(zhì)染色工具: Nile Green和Droplite Red 跟尼羅紅性質(zhì)類似,它們也是在富含脂質(zhì)的環(huán)境中具有強烈熒光的,而在水性介質(zhì)中具有zui小的熒光??捎脽晒怙@微鏡,流式細胞術(shù)或熒光微孔板閱讀器檢測細胞內(nèi)脂液滴,是一類優(yōu)異的活細胞脂質(zhì)染料。 其中Nile Green僅染色細胞內(nèi)脂液滴,具有綠色熒光,它可以與其他熒光染料一起使用,用于多重染色,彌補了尼羅紅染色的缺陷。
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