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近年來(lái),利用稀土熒光配合物作為標(biāo)記物的時(shí)間分辨熒光(TR-FRET)生化分析技術(shù)由于其具有靈敏度高,背景熒光干擾小等優(yōu)點(diǎn)在臨床免疫分析、核酸雜交分析和生物成像領(lǐng)域發(fā)揮著越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。
時(shí)間分辨熒光(TR-FRET)利用稀土元素中鑭系元素的*性質(zhì)。在TRF中常用的鑭系元素是釤(Sm)、銪(Eu)、鋱(Tb)、鏑(Dy)。與傳統(tǒng)熒光基團(tuán)相比,他們具有大的斯托克位移,和非常長(zhǎng)的發(fā)射半衰期(從微妙到毫秒),這使它們?cè)谏飳W(xué)熒光應(yīng)用領(lǐng)域中日益重要。
通過(guò)直接激發(fā)使鑭系元素離子產(chǎn)生熒光是不容易的,因?yàn)檫@些離子很難吸收光子,鑭系元素必須首先與有機(jī)分子形成復(fù)合物,有機(jī)分子收集光子并通過(guò)分子內(nèi)非放射性過(guò)程轉(zhuǎn)移到鑭系元素上。稀土元素螯合物和穴狀配合物是能量收集裝置的典型代表,他們收集能量并轉(zhuǎn)移到鑭系元素離子上,后者則發(fā)出其特征性的長(zhǎng)壽命熒光。
FRET 效應(yīng)其實(shí)是熒光現(xiàn)象的一種延伸。它是利用了一種熒光物質(zhì)發(fā)出的熒光,來(lái)激發(fā)另一種熒光物質(zhì),從而實(shí)現(xiàn)了熒光的“傳遞"。當(dāng)然,這種效應(yīng)的產(chǎn)生是需要一些特定條件的,其中之一便是要求兩種熒光物質(zhì)在空間距離上足夠接近,通常認(rèn)為在1-10nm范圍內(nèi)。
因此,F(xiàn)RET技術(shù)成為科研人員手中一把衡量分子間距離的“納米標(biāo)尺,基于這種功能,FRET技術(shù)被廣泛應(yīng)用于研究各類(lèi)分子間的相互作用,在臨床免疫分析、核酸雜交分析和生物成像領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。
知道了鑭系元素離子是FRET技術(shù)中非常重要的一環(huán),接下來(lái)就是這篇文章的“點(diǎn)睛之筆"氨基反應(yīng)性的銪標(biāo)記試劑盒。
氨基反應(yīng)性的銪標(biāo)記試劑盒,是艾美捷IVD級(jí)別熒光染料供應(yīng)商Columbia在FRET技術(shù)中應(yīng)用最為廣泛的鑭系元素離子——銪(Eu)離子標(biāo)記工具。另外還有一個(gè),是鏈霉親和素標(biāo)記銪螯合物W-1024。
氨基反應(yīng)性的銪標(biāo)記試劑盒可以給任何帶游離氨基的物質(zhì)標(biāo)記上銪離子,以標(biāo)記IgG為例,一個(gè)試劑盒可用于標(biāo)記高達(dá)1.2mg IgG,可得到5-9Eu / IgG。
以上,就是今天要介紹的銪(Eu)離子標(biāo)記工具——氨基反應(yīng)性的銪標(biāo)記試劑盒。
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