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西尼羅病毒(West Nile Virus,WNV)可引起人畜共患、蟲媒傳播的自然疫源性疾病,即西尼羅?。?span style="font-family: Calibri;">West Nile Disease,WND),雖然名字聽起來比較陌生,但是這并不是一種新發(fā)傳染病,只是大多數(shù)的感染者為隱性感染或低熱等非特異性癥狀。早在20世紀90年待,西尼羅病就爆發(fā)過,導致了人群大規(guī)模感染和高死亡率,并伴隨大量的鳥類、家禽、馬和牛等的死亡。雖然我國目前尚未出現(xiàn)人感染西尼羅病,但是未來仍然存在西尼羅病傳入和流行的風險,因此對西尼羅病毒的研究也有助于未來有效預測、預防和控制西尼羅病。
西尼羅病毒是一種基因組約為11kb的單股正鏈RNA病毒。該病毒基因組5’端為結(jié)構(gòu)蛋白區(qū),3’端為非編碼區(qū)。這種RNA可直接作為mRNA而翻譯成多肽,并在病毒和細胞內(nèi)蛋白酶的共同作用下被切割成3種結(jié)構(gòu)蛋白(衣殼蛋白C、胞膜蛋白E和膜蛋白prM/M)和7種非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、NS2a、NS2b、NS3、NS4a、NS4b和NS5)。其中E蛋白在西尼羅病毒的生命周期中起著重要作用,也是產(chǎn)生中和抗體的主要病毒蛋白。由于E蛋白可以介導病毒附著以及病毒和宿主的融合,并且大多數(shù)中和抗體是針對E蛋白上的抗原表位產(chǎn)生的,因此E蛋白是目前西尼羅病毒疫苗開發(fā)的最佳研究靶點。
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西尼羅病毒胞膜蛋白ELISA檢測試劑盒原理:
抗WNV E蛋白的抗體被吸附到微量滴定板上。樣品或標準品中存在的WNV E蛋白與吸附在平板上的抗體特異性結(jié)合;添加生物素標記的抗WNV E蛋白抗體,與捕獲的抗原WNV E蛋白結(jié)合。
在孵育和洗滌步驟之后,加入HRP偶聯(lián)的鏈霉親和素,與生物素標記的抗WNV E蛋白抗體結(jié)合。在洗滌步驟中去除未結(jié)合的鏈霉親和素,將與HRP反應的底物溶液添加到孔中。
有色產(chǎn)物的形成與樣品中存在的WNV E蛋白的量成比例。加入酸終止反應,并在450nm處測量吸光度。用標準品WNV E蛋白制備標準曲線,然后確定樣品WNV E蛋白濃度。
西尼羅病毒胞膜蛋白ELISA檢測試劑盒標曲:
發(fā)表文章:
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