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1953年,Stein等用Dowex 50柱層析法測定人尿液中氨基酸時,在洗脫曲線上發(fā)現(xiàn)一個未知的茚三酮陽性物質(zhì)峰.尿液用酸水解后再作層析,這個峰仍存在,表明不是多肽.次年,Tallan等鑒定出這個峰是3-甲基組氨酸(3-methylhistidine,3-MH).
3-甲基組氨酸是一種翻譯后修飾的氨基酸,可從人體尿液中排出。3-甲基組氨酸在尿液中的濃度可作為肌肉損傷的人類的骨骼肌蛋白質(zhì)分解的可靠指標。
3-甲基組氨酸是參與組成骨骼肌收縮的蛋白的氨基酸成分。當肌肉收縮引起骨骼肌收縮蛋白分解時,釋放出3-甲基組氨酸,因肌細胞中無相應(yīng)的分解及再利用的酶,故從尿中排出。食用豆制品和肉類,尤其是雞肉,尿液中的3-甲基組氨酸濃度也會升高。
艾美捷 3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒,基于競爭性酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。將3-MH預(yù)包被在96孔板上。將標準品、測試樣品和生物素偶聯(lián)試劑加入孔中并孵育。預(yù)包被的3-MH和樣品中的3-MH與含有生物素標記的抗體發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)。然后加入結(jié)合了HRP的試劑,并孵育整個板子。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的綴合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后,只有含有足夠3-MH的孔才會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強度與板上結(jié)合的3-MH量成反比。在酶標儀中于450 nm處用分光光度法測量OD,由此可以計算3-MH的濃度。
該3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒采用比色法,以血清、血漿等為樣本,用于體外定量測量血清、血漿等樣本中的3-甲基組氨酸(3-MH)濃度。且僅用于科研,不可用于臨床診斷。
3-甲基組氨酸(3-MH)標曲如下(經(jīng)過驗證):
以上就是有關(guān)3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒的簡單介紹。
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