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Cytoskeleton 艾美捷Rac和Cdc42激活劑(Cat.#CN02)可有效激活多種培養(yǎng)細(xì)胞中的Rac1、Rac2、Rac3和Cdc42。該試劑激活成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和造血細(xì)胞以及其他原代和永生細(xì)胞系中的Rac和Cdc42蛋白。經(jīng)激活劑處理的細(xì)胞可接受多種檢測中的任何一種,這些檢測表明Rac或Cdc42活性增加,包括膜皺褶和板層足(Rac)染色(Cat.#BK005和圖2)以及G-LISA的Rac或Cdc42活性檢測™ ,通過G-LISA分析測量的Cdc42激活示例。EGF在CN02中通過單位測量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,因此100 ng EGF是CN02的一個單位。
Cytoskeleton 覆蓋肌動蛋白,微管蛋白,馬達(dá)蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測與分析試劑盒。
Cytoskeleton/艾美捷Rac/Cdc42激活劑II用途包括:
1.Rac和Cdc42激活研究的陽性對照。
2.研究Rac和Cdc42激活對細(xì)胞運(yùn)動的影響。
3.研究Rac激活對肌動蛋白細(xì)胞骨架重排的影響。
4.研究Rac和Cdc42激活對其他信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的串?dāng)_的影響。
表皮細(xì)胞肌動蛋白激酶(EGFⅡ)通過表皮肌動蛋白激酶(CDCⅡ)刺激細(xì)胞膜生長。瑞士3T3細(xì)胞在1-10分鐘內(nèi)發(fā)生的這種主要形態(tài)反應(yīng)已被證明是通過激活Rac介導(dǎo)的(1)。定量測定活性(GTP結(jié)合)小G蛋白數(shù)量的生化分析表明,Rac和Cdc42都能通過EGF刺激快速激活(30秒-2分鐘內(nèi))(2,3)。EGF治療后的第二反應(yīng)是肌動蛋白應(yīng)力纖維的形成,其通過激活Rho(1)介導(dǎo)。EGF是研究Rho信號通路的有用工具,值得注意的是,EGF激活了其他幾個重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,包括Ras/Raf/MAPK、JAK/STAT和PI3K/AKT,數(shù)據(jù)應(yīng)作相應(yīng)解釋。
References:
1) Ridley A. et al. 1992. The small GTP-binding protein rac regulates growth factor-induced membrane ruffling. Cell 70,401-410.
2) Tu S. et al. 2003. Epidermal growth factor-dependent regulation of Cdc42 is mediated by the Src tyrosine kinase. J. Biol. Chem. 278,49293-49300.
3) Kim et al. 2008. Epidermal growth factor-induced enhancement of glioblatoma cell migration in 3D arises from an intrinsic increase in speed but an extrinsic matrix- and proteolysis-dependent increase in persistence. Mol Bio Cell. 19, 4249-4259.
在1.0和1.5小時,分別用0.0%和10.0%的血清和1.0%和16.0%的血清處理細(xì)胞(1.0和10.0,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,3,1.0,6,1.0,1.0,1.0,1.0,3,1.0,1,6,1,1,1,1。經(jīng)Cdc42 G-LISA處理的細(xì)胞裂解物™ (BK127)測定,并在490 nm處讀取OD。繪圖前,從這些樣本中減去“受控狀態(tài)"血清饑餓值(0.22)。在1.0單位/毫升時,總激活率是1.5分鐘時對照狀態(tài)的2.05倍或105%。
Cytoskeleton/艾美捷 相關(guān)研究工具:
Rho Activator I Cat#CN01-A
Rho Inhibitor I Cat#CT01-A
Cdc42 G-LISA Activation Assay (Colorimetric Format) - 96 Assays Cat#BK127
Rho Activator II Cat#CN03-A
艾美捷科技是Cytoskeleton的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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